[发明专利]一种测定土壤和食品中镍的小鼠生物有效性的方法

说明书

本发明公开了一种测定土壤和食品中镍的小鼠生物有效性的方法，具体步骤是制作含有镍的食品喂养小鼠，并采集小鼠尿液，最终获得土壤和食品中镍的小鼠相对生物有效性，本发明在常规实验方法上进行改进创新，设计出了一个能准确有效测定出土壤和食品中镍的小鼠生物有效性的方法，即将镍积累的终点定位在尿液，通过收集小鼠的尿液，测定尿液中镍的含量得出小鼠吸收镍的量，从而计算出镍的小鼠相对生物有效性。

技术领域

本发明涉及环境科学领域，具体是一种测定土壤和食品中镍的小鼠生物有效性的方法。

背景技术

土壤和食品中镍的人体健康风险评价通常采用镍的生物有效性进行评估。镍的人体生物有效性是指镍被人体所吸收的量与镍的总摄入量的比值，这个比值≤100％。而测定生物有效性的方法分为动物活体实验和体外模拟实验两种。体外模拟实验有着简单便捷的优点但结果通常误差大，难以模拟人体真实情况。动物活体实验周期长、操作复杂却能较为准确地反映出动物体对污染物的生物有效性，从而进行相关的人体健康风险评价。小鼠是动物活体实验最为常用的模式动物之一。目前如果使用常规的小鼠实验方法对土壤和食品中镍的小鼠生物有效性进行测定，即将最后指示镍积累的靶器官定为肝脏和肾脏，经过实验发现镍并不能在小鼠的肝脏和肾脏中积累，无法测定出小鼠的生物有效性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种测定土壤和食品中镍的小鼠生物有效性的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种测定土壤和食品中镍的小鼠生物有效性的方法，其具体步骤如下：

(1)将可溶性的镍的参比物质添加到低镍浓度的食品中，便于制作镍一定浓度范围的标准曲线；

(2)按照步骤(1)中的不同浓度范围的食物对小鼠分组，每组小鼠若干只并使用步骤(1)制备的含有镍元素的鼠粮喂食小鼠，进行7天的喂食暴露，随后是1天的空腹处理；在8天期间，将小鼠单独安置在代谢笼中，提供充足的普通鼠粮以及Mili-Q水，并分离和收集尿液；

(3)将步骤(2)收集的尿液样本分别在3000r/min的离心机中离心10min，并用0.45μm的滤膜过滤,用0.1mol的HNO₃稀释10倍后，用ICP-MS分析尿液中镍的含量；

(4)饮食消耗量为提供饮食的总质量和暴露结束时的剩余量的差值，通过尿液中镍的浓度与体积的乘积，计算出尿液中镍的含量；

镍暴露的总剂量为提供的鼠粮中镍的浓度与饮食消耗量的乘积；

获取尿液校正因子：

并根据尿液中镍的含量、镍暴露的总剂量和尿液校正因子制作标准的参考曲线；

(5)针对待检测的土壤：将需要测定的土壤以5％的浓度添加到低镍浓度的食品中，制作成易于小鼠食用的鼠粮；

针对待检测的食品，将需要测定的食品直接打碎制作成易于小鼠食用的鼠粮；

然后按照上述步骤(2)-(4)的方法计算出待测土壤或者食品的尿液剂量校正因子，最终可以按以下公式计算出镍的小鼠相对生物有效性：

作为本发明进一步的方案：所述步骤(1)中的参比物质按照0、0.5、1.0、1.5和2.5mg Ni Kg^-1的浓度进行配置。

作为本发明进一步的方案：所述步骤(1)中的参比物质是硫酸镍。

作为本发明进一步的方案：所述步骤(2)中小鼠采用Balb/c，体重为16g。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：