[发明专利]杨梅素在制备沙门氏菌Ⅲ型分泌系统抑制剂中的应用

说明书

本发明涉及杨梅素在制备沙门氏菌Ⅲ型分泌系统抑制剂中的应用，以人宫颈癌细胞(HeLa)为感染载体，通过体内外试验证实杨梅素通过抑制Ⅲ型分泌系统的功能，从而对沙门氏菌感染具有显著的抑制作用。相比传统抗生素在直接杀死沙门氏菌的作用机制，中药化合物杨梅素可直接抑制沙门氏菌Ⅲ型分泌系统的功能而发挥抗感染的作用，给予细菌的选择压力小，不易诱导细菌耐药性的产生，具有来源广泛、成本低廉和治愈率高的特点。

技术领域

本发明涉及杨梅素抑制沙门氏菌三型分泌系统(T3SS)及在制备治疗沙门氏菌感染药物中的应用，属于医学制药技术领域。

背景技术

1885年沙门氏等人首次分离到猪霍乱沙门氏菌并定名为沙门氏菌属。沙门氏菌为两端钝圆的革兰氏阴性短杆菌，无芽孢，一般无荚膜。它是引发人类和动物食物中毒的首要食源性病原菌之一，也是在全球公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病原菌。沙门氏菌除可感染人外，还可感染很多动物，人畜感染后可呈无症状或带菌状态，也可表现为有临床症状的致死性疾病，它可加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力。目前临床上沙门氏菌感染较难控制，治疗效果往往不理想，给畜禽养殖业造成了巨大的经济损失，并严重威胁公共健康和食品安全。目前，对抗沙门氏菌感染普遍采用抗生素进行治疗，但抗生素的长期使用及滥用导致沙门氏菌的耐药性日益加剧，耐药谱加宽。因此临床上迫切需要寻求新的抗感染策略及药物来防治沙门氏菌感染。

近年来研究发现病原菌的致病力与其分泌的各种毒力蛋白或效应蛋白密切相关，但上述蛋白分子不是细菌生命的必需成分。Ⅲ型分泌系统(T3SS)广泛的分布于革兰氏阴性细菌中，其主要功能是分泌和转运病原菌毒力因子。对于沙门氏菌，其致病力便是通过两套T3SS系统分泌效应蛋白，分别介导细菌侵入和在胞内的增殖，在其致病过程中起着决定性作用。因此，以T3SS效应蛋白或蛋白复合物为靶标的药物筛选策略成为新的研究方向，不仅可发挥抗感染作用，而且对细菌选择性压力小，不易诱导产生耐药性。

杨梅素为为黄色针状晶体，是杨梅科杨梅属植物杨梅的树叶、皮、根的提取物，具有多种药理学活性，如具有降血糖、抗氧化、保肝护肝、抗血栓、改善微循环等作用。目前，国内外未见杨梅素通过抑制沙门氏菌Ⅲ型分泌系统的功能来抵抗沙门氏菌感染的报道。

发明内容

本发明所述杨梅素CAS登录号为529-44-2，分子式为C₁₅H₁₀O₈，分子量为318.24。

杨梅素的化学结构式如下：

本研究以沙门氏菌Ⅲ型分泌系统效应蛋白为药物靶标筛选得到的天然化合物杨梅素在较低浓度下通过阻断T3SS关键效应蛋白SipA的转运进而抑制沙门氏菌T3SS的功能，显著降低效应蛋白(SipA、SipB和SipC)的表达水平且不影响细菌生长。体外试验表明，在有效浓度范围内杨梅素不具有细胞毒性，经杨梅素预处理沙门氏菌后，沙门氏菌侵入HeLa细胞的能力显著降低。体内试验中，经杨梅素治疗后沙门氏菌感染小鼠存活率达42.86％，靶器官(肝脏、脾脏和盲肠)菌落定殖数显著降低。

附图说明

图1：杨梅素抑制沙门氏菌Ⅲ型分泌系统的功能(蓝色表示效应蛋白SipA的转运功能正常；绿色效应蛋白SipA不能正常转运)

图2：杨梅素治疗显著提高沙门氏菌感染小鼠保护率(横轴表示时间，纵轴表示存活率)

图3：杨梅素降低感染小鼠靶器官菌落定殖数(横轴表示不同处理组肝脏、脾脏和盲肠组织，纵轴为菌落定殖数)

具体实施方式

通过以下实施进一步举例描述本发明，并不以任何方式限制本发明，在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。

实施例1