[发明专利]一个影响绵羊早期生长的分子标记、检测方法及其应用

权利要求书

1.一种用于扩增影响湖羊早期体重的分子标记的引物对在筛选高生长性状的湖羊中的应用；其特征在于所述的生长性状为初生体重、断奶体重，所述的引物对的上游引物P1如SEQ ID NO：1所示，下游引物P2如SEQ ID NO：2所示，所述的分子标记为以所述引物对PCR扩增湖羊基因组DNA得到的490 bp的扩增产物，其包含PLAG1基因3’UTR区中TGTAACACCGAACTGG核苷酸序列的第9位的位点，该位点具有C/T多态性，CT型初生体重、断奶体重高于CC型。

2.一种筛选高生长性状的湖羊的方法，其特征在于所述的生长性状为初生体重、断奶体重，所述方法包括检测权利要求1所述分子标记中湖羊PLAG1基因3’UTR区中TGTAACACCGAACTGG核苷酸序列的第9位位点的C/T多态性，CT型初生体重、断奶体重高于CC型，选择CT型个体留种。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于包含以下步骤：

1）提取湖羊基因组DNA；

2）利用权利要求1中所述的引物对PCR扩增PLAG1基因3’UTR区序列，得到490 bp扩增产物；

3）利用权利要求1中所述的引物P2对490 bp扩增产物进行测序分型，分为CC型、CT型；

4）选择CT型个体留种。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述PCR扩增的反应总体系为20 μL，模板DNA 15-100 ng，5 U/μL Taq聚合酶 0.2μL，10 mM的 dNTP 0.5 μL，引物P1和P2各5 pmol，25 mM 的MgCl₂ 1.2-1.6 μL，10×缓冲液 2 μL，加灭菌双蒸水至20 μL；所述PCR扩增的反应程序为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，52-54 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，35个循环；72 ℃延伸7 min。