[发明专利]一种观赏水草南极杉的组织培养方法

说明书

本发明涉及一种观赏水草南极杉的组织培养方法，包括以下步骤：(1)预处理；(2)将预处理的外植体切割成1‑1.5cm长的外植体，切割后的每个外植体至少带一个腋芽；将切割后的外植体接入初代培养基进行初代培养；(3)分离初代培养基中的初代不定芽，使初代不定芽长度控制在2cm以内；将分离后的初代不定芽转入增殖培养基中培养；(4)将增殖培养基中长度大于3‑4cm的植株转入生根培养基培养；(5)将带有完整根系的南极杉植株从生根培养基中取出，清水冲洗后移栽到生态缸中。该方法不受季节、温度、地域影响就能获得大量的新植株，快速建立南极杉无菌繁殖体系，为保持南极杉优良的种性提供技术支持，为广大的爱好者提供源源不断地无菌种苗。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，更具体地，涉及一种观赏水草南极杉的组织培养方法。

背景技术

南极杉，是一种较常用的观赏水草。南极杉为沉水草本植物，车前科，双子叶植物，挺水性水草。野生情况下，每到花期，水面如花海般美丽，草缸培育也能看到它开花的情形。这种水草在水中颇能适应广泛的水质变化，在弱光下也能生长，但仍以较强光线培育为佳。南极杉在形态上比较像绿羽毛，区别在于前者是针状叶，后者是羽状叶。南极杉目前繁殖方式为插枝、侧芽繁殖。

但是，目前尚缺乏成熟的技术用于大规模繁殖优质的南极杉植株。

发明内容

针对现有技术存在的技术问题，本发明提出了一种观赏水草南极杉的组织培养方法，该方法是在无菌条件下，采取适宜培养环境、给予固定光照，诱导南极杉新的幼苗，逐步形成无菌苗体系，后期可常年提供大量无菌幼苗。该方法易行，操作方便，产量高，克服了南极杉在水族缸中不易繁殖、繁殖速度慢、植物种苗获得困难的问题。

为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

一种观赏水草南极杉的组织培养方法，包括以下步骤：

(1)预处理：选择健康、无病虫害的南极杉植株经灭菌处理、清洗，得到消毒灭菌后的无菌外植体；

(2)初代培养：将消毒后的无菌外植体在无菌培养皿中切割成1-1.5cm长的外植体，切割后的每个外植体至少带一个腋芽；将切割后的外植体转接入初代培养基进行初代培养10-20天；

(3)增殖培养：分离初代培养基中的初代不定芽，使初代不定芽长度控制在2cm以内；将分离后的初代不定芽转入增殖培养基中进行增殖培养22-30天；

(4)生根培养：将增殖培养基中长度大于3-4cm的植株转入生根培养基，进行生根培养；

(5)移栽：将带有完整根系的南极杉植株从生根培养基中取出，清水冲洗后移栽到生态缸中。

进一步地，步骤(1)中外植体灭菌处理、清洗的具体方法为：流水冲洗外植体30min，75％酒精消毒15-30s，冲洗3次；1％次氯酸钠消毒10-20min，再用无菌水冲洗5次。

进一步地，所述初代培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.5-1.5mg/L激动素+0.05-0.5mg/L萘乙酸。

进一步地，所述增殖培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+1-2.5mg/L6-BA+0.5-1mg/L萘乙酸。

进一步地，所述生根培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.1-0.5mg/L生长素。

更进一步地，所述生根培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.1-0.5mg/L吲哚乙酸。

进一步地，所述初代培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。

进一步地，所述增殖培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。