[发明专利]一种花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法

权利要求书

1.一种花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法包括以下步骤：

(1)一提：以欧洲越橘冻果为原料，粉碎，按料液质量体积比1：2.0～3.0加入体积分数为60％～85％的酸化乙醇溶液，搅拌提取，提取结束后离心过滤，得一提滤液及一提滤渣，其中，所述酸化乙醇溶液是用苹果酸或柠檬酸调节pH至3～4；

(2)二提：一提滤渣转移至提取罐中，加入与步骤(1)中同等体积和浓度的酸化乙醇溶液，搅拌提取，提取结束后离心过滤，得二提滤液及二提滤渣；

(3)提取浓缩：取一提滤液，水浴减压浓缩，回收乙醇，离心过滤，得提取浓缩液，快速降至25℃或以下；

(4)分离柱预处理：以聚酰胺大孔树脂填装分离柱，填装后用85％～95％乙醇洗净树脂，再用纯化水洗脱至流出液酒精计检测酒精度≤3.0％；

(5)吸附：将提取浓缩液通过分离柱进行吸附，流速控制为1～3BV_柱/h，花色苷的单位吸附量控制为6～21mg/ml，其中，所述1～3BV_柱/h是指1h通过提取浓缩液的体积为树脂体积的1～3倍；

(6)水洗：吸附结束后，用2～5BV_柱的纯化水洗柱，去除杂质，其中，所述纯化水用苹果酸或柠檬酸调节pH至3～4；

(7)醇洗及解吸：水洗结束后，先用0.5～1.0BV_柱体积分数为30％～70％的乙醇洗脱，流速控制为2～4BV_柱/h，洗脱液回收，再用6～8BV_柱体积分数为70％～95％的乙醇解吸，解吸流速控制为2～4BV_柱/h，其中，所述乙醇用苹果酸或柠檬酸调节pH至3～4；

(8)浓缩、干燥：将解吸液水浴减压浓缩至物料无流动性，取出后放入真空干燥箱中真空干燥，即得花色苷含量高的欧洲越橘提取物。

2.根据权利要求1所述的花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述步骤(1)和(2)中搅拌提取时温度为25±5℃，搅拌线速度≥50m/min。

3.根据权利要求1所述的花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述步骤(1)和(2)中二提滤液作为下一批一提的提取溶剂。

4.根据权利要求1花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中树脂填充高度h：柱内径d＝2～12：1；优选地，所述步骤(4)中水洗流速控制为2～4BV柱/h。

5.根据权利要求1所述的花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中花色苷的单位吸附量控制为9～15mg/ml。

6.根据权利要求1所述的花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述步骤(7)中先用体积分数为40％～60％的乙醇洗脱，再用体积分数为80％～90％的乙醇解吸。

7.根据权利要求1花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述步骤(3)和(8)中减压浓缩是于60±5℃，-0.090～-0.100MPa条件下水浴减压浓缩。

8.根据权利要求1所述的花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述步骤(8)中真空干燥是在真空干燥箱中于50±5℃，-0.090～-0.100MPa条件下真空干燥。

9.根据权利要求1所述的花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述欧洲越橘提取物总花色苷含量使用高效液相色谱法检测，以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷氯化物计，所述花色苷含量高的欧洲越橘提取物中总花色苷含量不低于65％。

10.根据权利要求1花色苷含量高的欧洲越橘提取物制备方法，其特征在于，所述检测方法的分析条件为：

色谱柱：Zorbax Extend-C₁₈，5μm，4.6*250mm

进样量：20uL

流动相：A相：色谱甲酸：水＝1:9

B相：色谱甲酸：水：色谱乙腈：色谱甲醇＝4：16：9：9

泵流速：1.0ml/min

检测波长：535nm

柱温箱：30℃

洗脱梯度：

时间	0.01min	35min	45min	46min	60min
流动相A	93％	75％	35％	0％	0％
流动相B	7％	25％	65％	100％	100％

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