[发明专利]一种用于高温胁迫下玉米花粉活力高通量测定的标准化样本制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201911225614.9 | 申请日： | 2019-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN110999655A | 公开（公告）日： | 2020-04-14 |
| 发明（设计）人： | 李会勇;贾腾蛟;李晶晶;曹言勇;王利锋;马娟;王浩 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院粮食作物研究所 |
| 主分类号： | A01G7/00 | 分类号： | A01G7/00;A01G31/00;A01H1/04;G01N1/28;G01N1/44 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 秦梦楠 |
| 地址： | 450002 河南省郑州市金水区*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 高温 胁迫 玉米 花粉 活力 通量 测定 标准化 样本 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种用于高温胁迫下玉米花粉活力测定的标准化样本制备方法，包括如下步骤：
(A1)收集待测玉米雄穗，在特定条件下水培至盛花期，取花粉；所述特定条件为每24小时中，24℃光培养16小时/18℃暗培养8小时；
(A2)将步骤(A1)得到的花粉进行高温处理，得到用于高温胁迫下玉米花粉活力测定的标准化样本。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述待测玉米雄穗是在玉米抽雄后开始散粉时收集。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
所述高温处理在可实现温度控制的装置中进行；
和/或，
所述高温处理为40℃处理30-70min。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述可实现温度控制的装置为PCR仪。
5.一种高温胁迫下玉米花粉活力的测定方法，包括如下步骤：
(B1)按照权利要求1-4任一所述方法制备待测玉米标准化样本；
(B2)对步骤(B1)制备得到的标准化样本进行花粉活力测定。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：
所述步骤(B2)中，采用花粉活力测定仪测定花粉活力；
进一步地，所述花粉活力测定仪为AmphaTM Z32。
7.下述任一应用；
(C1)权利要求1至4任一所述的方法在高温胁迫下玉米花粉活力测定中的应用；
(C2)权利要求1至6任一所述的方法在高通量测定高温胁迫下玉米花粉活力中的应用；
(C3)权利要求1至6任一所述的方法在检测或辅助检测玉米高温耐性中的应用；
(C4)权利要求1至6任一所述的方法在耐高温玉米新种质的鉴定与创制中的应用。
8.检测或辅助检测玉米高温耐性的方法，包括如下步骤：
(D1)检测待测玉米花粉原始活力；
(D2)按照权利要求5或6所述方法检测待测玉米高温胁迫下花粉活力；
(D3)计算(D1)和(D2)的差值，差值越小的玉米高温耐性越高；
步骤(D1)中，所述“检测待测玉米花粉原始活力”的方法包括如下步骤：
(1)收集待测玉米雄穗，在特定条件下水培至盛花期，取花粉；所述特定条件为每24小时中，24℃光培养16小时/18℃暗培养8小时；
(2)对步骤(1)获得的花粉进行活力测定，得到待测玉米花粉原始活力。
9.耐高温玉米新种质的鉴定与创制方法，包括如下步骤：按照权利要求8所述方法检测玉米高温耐性，筛选高温耐性高的玉米作为创制耐高温玉米新种质的基础材料。
10.一种用于花粉活力测定的标准化培养方法：收集待测玉米雄穗，在特定条件下水培至盛花期，取花粉；所述特定条件为每24小时中，24℃光培养16小时/18℃暗培养8小时。
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