[发明专利]一种梅花配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法及其成分含量测定方法在审
| 申请号: | 201911222670.7 | 申请日: | 2019-12-03 |
| 公开(公告)号: | CN110927312A | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
| 发明(设计)人: | 魏梅;李国卫;吴文平;何民友;潘礼业;孙冬梅;陈向东;程学仁 | 申请(专利权)人: | 广东一方制药有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86 |
| 代理公司: | 广州一锐专利代理有限公司 44369 | 代理人: | 杨昕昕;董云 |
| 地址: | 528000 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 梅花 配方 颗粒 uplc 特征 图谱 构建 方法 及其 成分 含量 测定 | ||
1.一种梅花配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,包含如下步骤:
(1)精密称取梅花配方颗粒粉末,制备得到梅花配方颗粒供试品溶液;
(2)将梅花配方颗粒供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析,得到梅花配方颗粒UPLC特征图谱。
2.根据权利要求1所述的梅花配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温为30~50℃,以甲醇为流动相A,以0.05~0.15%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速为0.2~0.3ml/min,检测波长为330~380nm,进样量为0.5~2μl。
3.根据权利要求2所述的梅花配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述梯度洗脱条件为:0~10min,流动相A的体积分数为13%,流动相B的体积分数为87%;10~11min,流动相A的体积分数变化为13%~21%,流动相B的体积分数变化为87%~79%;11~35min,流动相A的体积分数变化为21%~23%,流动相B的体积分数变化为79%~77%;35~43min,流动相A的体积分数变化为23%~40%,流动相B的体积分数变化为77%~60%;43~45min,流动相A的体积分数变化为40%~100%,流动相B的体积分数变化为60%~0%;45~47min,流动相A的体积分数为100%,流动相B的体积分数为0%;47~47.1min,流动相A的体积分数变化为100%~13%,流动相B的体积分数变化为0%~87%;47.1~55min,流动相A的体积分数为13%,流动相B的体积分数为87%。
4.根据权利要求1所述的梅花配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述的供试品溶液的制备方法为:取梅花配方颗粒,研细,取0.05~0.15g,精密称定,精密加入50~90%甲醇15~50mL,称定重量,超声处理15~60分钟,取出,放冷,用50~90%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤膜滤过,即得。
5.一种梅花配方颗粒的成分含量测定方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)分别吸取对照品溶液和待测梅花配方颗粒样品溶液注入超高效液相色谱仪,测定相应峰面积;
(2)通过外标法计算金丝桃苷的含量;
(3)再通过一测多评法计算绿原酸、异槲皮苷、芦丁的含量。
6.根据权利要求5所述的梅花配方颗粒的成分含量测定方法,其特征在于,所述对照品溶液的制备方法为:分别取绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、芦丁对照品,置10ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,配制成质量浓度为750~850、60~100、80~100、80~100μg/mL的对照品溶液,即得。
7.根据权利要求5所述的梅花配方颗粒的成分含量测定方法,其特征在于,所述待测梅花配方颗粒样品溶液的制备方法为:取梅花配方颗粒,研细,取0.05~0.15g,精密称定,精密加入50~90%甲醇15~50mL,称定重量,超声处理15~60分钟,取出,放冷,用50~90%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤膜滤过,即得。
8.根据权利要求5所述的梅花配方颗粒的成分含量测定方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温为30~50℃,以甲醇为流动相A,以0.05~0.15%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速为0.2~0.3ml/min,检测波长为330~380nm,进样量为0.5~2μl。
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