[发明专利]一种利用气相色谱-质谱测定稻米中脂肪酸的方法

说明书

本发明公开了一种利用气相色谱‑质谱测定稻米中脂肪酸的方法，包括如下步骤：(1)待测样品制备：将稻米样品粉碎，然后依次加入正己烷、乙酰氯‑甲醇溶液和二丁基羟基甲苯进行混合，混合后加热进行脂肪酸的提取及甲酯化处理；然后冷却至室温，加入碳酸钠溶液混匀、离心，取上层清液，过滤得到待测样品；(2)脂肪酸成分测定：采用气相色谱‑质谱联用仪对步骤(1)得到的待测样品的37种脂肪酸进行定量或定性测定。通过本发明提取方法和测定方法的共同配合，实现了对稻米中37种脂肪酸的精确定性、定量，解决了现有技术无法对稻米中脂肪酸成分进行准确测定的难题，同时在保证脂肪酸成分测定准确性的基础上，又能实现种类较多的脂肪酸测定。

技术领域

本发明涉及脂肪酸测定技术领域，具体涉及一种利用气相色谱-质谱测定稻米中脂肪酸的方法。

背景技术

油脂是人类摄取能量的主要来源，更为重要的是，它能提供人体所需的必需脂肪酸。植物脂肪酸是植物营养成分的重要组成成分,其组分和含量比例决定了植物油脂的品质、营养价值其生物效应，植物脂肪酸主要分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸，其含量的测定对分析植物营养价值的好坏有至关重要的作用。因此，开展一种可以准确检测植物脂肪酸的方法，对于深入了解植物脂肪酸组分的构成，进而改良植物中油脂含量进而改善人类膳食结构，促进人类饮食健康，有深远的影响。

中国是世界水稻生产和消费大国，种植面积居世界第二，稻谷总产量居世界第一，近 2/3人口以大米为主粮。稻米中脂类多为优质的脂肪酸,不饱和脂肪酸含量较高,具有很高的营养价值。同时,稻米中脂类含量还是影响米饭可口性的主要因素。研究认为,稻米脂类含量与食味品质呈极显著正相关,且较其他品质指标对稻米食味品质的影响更大,属于是直接效应。因此,研究不同水稻品种籽粒中脂肪及脂肪酸组分的差异对于作物育种工作者具有重要意义。

虽然随着高灵敏质谱技术的发展，目前也出现了利用气相色谱-质谱联用技术对脂肪酸进行测定，但是目前的气相色谱-质谱联用技术只能实现种类比较少的脂肪酸测定，针对于种类较多且复杂的脂肪酸成分测定，准确性差，由于稻米中的脂肪酸种类复杂，含量参差不齐，很少有出现对稻米中脂肪酸成分进行测定的相关报道，更没有如何通过气相色谱-质谱联用法实现对稻米中脂肪酸成分准确测定的相关研究和报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种利用气相色谱-质谱测定稻米中脂肪酸的方法，通过本发明脂肪酸的提取方法，能够避免稻米中其他成分的干扰，有效的将脂肪酸从稻米中提取出来；通过本发明气相色谱-质谱方法，并采用MRM的检测模式，对提取的脂肪酸进行成分测定，提高了脂肪酸测定的准确性。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种利用气相色谱-质谱测定稻米中脂肪酸的方法，包括如下步骤：

(1)待测样品制备：将稻米样品粉碎，然后依次加入正己烷、乙酰氯-甲醇溶液和二丁基羟基甲苯进行混合，混合后加热进行脂肪酸的提取及甲酯化处理；然后冷却至室温20-25℃，加入碳酸钠溶液混匀、离心，取上层清液，过滤得到待测样品；

(2)脂肪酸成分测定：采用气相色谱-质谱联用仪对步骤(1)得到的待测样品的37种脂肪酸进行定量或定性测定。

优选的，步骤(1)中，步骤(1)中，所述稻米样品、正己烷、乙酰氯-甲醇溶液和二丁基羟基甲苯加入量的比为(0.05-0.1)g：(2-3)ml：(2-3)ml：(0.2-0.3)mg；乙酰氯-甲醇溶液的体积分数为10％。

优选的，步骤(1)中，稻米样品在粉碎时在液氮中进行，所述稻米样品采用成熟的稻米干燥种子。

优选的，步骤(1)中，加热条件为水浴加热，水浴加热的温度为80℃±1℃，时间为2h。

优选的，在水浴加热期间每隔20-25min取出振摇1次。