[发明专利]流感病毒核蛋白抗原保护液及包含其的试剂和试剂盒

说明书

本发明提供了一种流感病毒核蛋白抗原保护液及包含其的试剂和试剂盒，涉及诊断试剂技术领域。该流感病毒核蛋白抗原保护液包括(a)20～50mM Tris；(b)0.5～2.5mM氨基吡啉；(c)0.5～10w/v％牛血清白蛋白和/或0.5～10w/v％胎牛血清；和，任选的辅料。该流感病毒核蛋白抗原保护液能够使作为抗原的流感病毒核蛋白具有较高的反应性和信噪比，将该流感病毒核蛋白抗原保护液作为流感病毒核蛋白抗原的稀释液以及用于将流感病毒核蛋白抗原包被于载体上的包被稀释液，能够使流感病毒核蛋白抗原保持较好的热加速稳定性和实时稳定性。

技术领域

本发明涉及诊断试剂技术领域，尤其是涉及一种流感病毒核蛋白抗原保护液及包含其的试剂和试剂盒。

背景技术

流行性感冒简称流感，是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。流感病毒属正粘病毒科(Orthomyxoviridae)，流感病毒属，为单链负义RNA病毒。流感病毒根据核壳蛋白和基质膜蛋白抗原性的不同可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三个血清型，其中甲型流感变异较快，对于人类，禽类及其它哺乳动物具有极强的致病性，能够引起世界范围内的大流行。乙型流感病毒变异较慢，仅能引起局部范围的小流行。丙型流感病毒变异最慢，致病毒力弱，通常只能感染抵抗力较低的孕妇和小孩。乙型及丙型流感一般只见于人类。甲、乙、丙三型不但反映了病毒被分离的年代顺序，还反映了对人类的危害程度。

根据病毒表面抗原糖蛋白血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的抗原性差异，甲型流感病毒又可分为16种H亚型(H1-H16)和9种N亚型(N1–N9)。流感病毒颗粒由约1％RNA、70％蛋白质、20％的脂质和5-8％的碳水化合物组成。脂质位于病毒的膜内，大部分为磷脂，还有少量的胆固醇和糖脂。HA，NA，内膜基质蛋白(M1)及核蛋白(NP)是引起病毒抗原性的主要多肽分子，特别是和基因的高变异性决定着病毒的特殊性，形成了不同亚型的病毒粒子。

流感病毒核蛋白(NP)由片段5所编码的一种非糖基化蛋白，分子量约56KD为含有498个氨基酸。富含碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸及四个半耽氦酸残基，约占病毒总蛋白量的30％，流感病毒的NP蛋白非常保守，同型流感病毒NP的氨基酸相似性在90％以上，基因变异率很低，具有高度的特异性，因此是流感病毒感染血清学检测中较为理想的靶点蛋白。

目前用免疫学方法检测流感的试剂盒主要分为两类，一类为检测流感感染后免疫系统是否产生针对流感病毒的抗体即流感抗体检测试剂盒，一类为检测流感感染后鼻腔，口腔，血清样本中是否存在流感病毒抗原的流感抗原检测试剂盒，这两类试剂盒的检测中均需要用到相应的流感抗原，在流感抗原检测试剂盒不同滴度中，流感NP抗原样品可以用作阳性质控，校准品，内部参考品等；在流感抗体快速检测试剂中流感NP抗原可以作为包被物或者标记物用于检测试剂。因此流感NP抗原的稳定性对于流感检测试剂的稳定性尤为重要。尤其是将流感NP抗原应用到体外诊断试剂进行流感抗原或抗体检测中时，存在流感NP抗原在液体缓冲液条件下或在硝酸纤维素膜，醋酸纤维素膜等载体上固化后稳定性差的问题。因此一种能够提高流感NP抗原稳定性的产品是目前市场需要的。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种流感病毒核蛋白抗原保护液，该流感病毒核蛋白抗原保护液能够提高流感病毒核蛋白抗原的稳定性。

本发明的第二目的在于提供一种包含上述流感病毒核蛋白抗原保护液的试剂。

本发明的第三目的在于提供一种包含上述流感病毒核蛋白抗原保护液，或包含上述试剂的试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种流感病毒核蛋白抗原保护液，包括如下组分：

(a)20～50mM Tris；

(b)0.5～2.5mM氨基吡啉；