[发明专利]一种用于检测甲基丙二酸血症相关MUT基因突变位点的试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测甲基丙二酸血症相关MUT基因突变位点的试剂盒。本发明提供提供了检测MUT基因突变位点的成套引物，由如下引物组1至引物组13这13个引物组组成，并且根据该引物建立一种基于基因分子分型的MUT基因的突变位点高通量检测方法，可以在同一个反应内同一时间完成对人MUT基因c.729_730insTT、c.914T>C、c.1106G>A、c.2080C>T、c.2179C>T、c.494A>G、c.441T>A、c.1280G>A、c.323G>A、c.398_399delGA、c.755dupA、c.970G>A、c.1630_1631GG>TA等13个突变位点的突变分型，提高检测效率并降低成本，该方法检测通量高，操作简单可靠。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种用于检测甲基丙二酸血症相关MUT 基因突变位点的试剂盒。

背景技术

甲基丙二酸血症(methylmalonic academia，MMA)是一种常见的有机酸代谢障碍导致的遗传代谢病，属常染色体隐性遗传病，遗传性MMA目前可分为12个亚型，13个相关基因，最常见的亚型为变位酶缺陷和cblC缺陷，编码基因分别为MUT基因和MUT基因。变位酶缺陷型常在新生儿期就发病，病情危重，常可危及生命。ClbC缺陷型发病年龄较变位酶缺陷型较晚，但常在周岁之内发病，患儿常伴有生长发育迟缓。

MMA患儿治疗原则为特殊饮食、补充终生治疗、定期检测尿液甲基丙二酸含量。甲基丙二酸血症导致体内甲基丙二酸、丙酸等毒性有机酸升高，可引起代谢性酸中毒、高血氨、低血糖、高甘氧酸血症等，这些毒性物质的蓄积常造成中枢神经系统的损害，引起一系列神经系统损害症状，严重者可导致死亡。由于MMA患儿异常代谢产物可引起线粒体功能紊乱，导致能量产生及供给不足，从而引起各个组织、器官功能损害，所以患者临床表现多种多样，临床上容易误诊，从而延误治疗时机，严重影响患儿预后。由于MMA的危害性、遗传性及难治性，开展MMA致病基因研究，为MMA患者的早期诊断、早期干预及遗传咨询提供理论依据。

文献报道MUT基因突变类型有250多种，已证实单纯型MMA多由MUT基因突变引起。MUT基因突变可引起变位酶活性降低，导致患儿出现一系列临床症状。由 MUT基因突变引起的MMA，患儿多对维生素B12治疗无效，且80％患儿在出生1 周内出现症状，90％患儿于出生1个月内出现症状，病死率及并发症发生率极高。

由于MMA患儿具有不同的基因表型，具体治疗方法也随之不同。基因诊断及查找到致病性基因突变为确诊该病的金标准。因此，开展对MUT基因SNP的检测具有临床实用价值及优生学意义。

人MUT基因的突变类型如下：c.729_730insTT、c.914T>C、c.1106G>A、c.2080C>T、c.2179C>T、c.494A>G、c.441T>A、c.1280G>A、c.323G>A、c.398_399delGA、c.755dupA、c.970G>A、c.1630_1631GG>TA。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种检测MUT基因突变位点的成套引物。

本发明提供的成套引物，由如下引物组1至引物组13这13个引物组组成：

引物组1由特异引物1-1、特异引物1-2和通用引物1组成；

引物组2由特异引物2-1、特异引物2-2和通用引物2组成；

引物组3由特异引物3-1、特异引物3-2和通用引物3组成；

引物组4由特异引物4-1、特异引物4-2和通用引物4组成；

引物组5由特异引物5-1、特异引物5-2和通用引物5组成；