[发明专利]基于SSR标记的‘惠’自花结实性后代的高效选育试剂盒

说明书

本发明涉及一种基于SSR标记的‘惠’自花结实性后代的高效选育试剂盒，公开一种与‘惠’自花结实性有关的SSR分子标记Ch04d02。在‘惠’自花结实性后代中表现114bp：126bp基因分型。本发明还提供一种用于鉴定上述SSR分子标记的引物，通过该分子标记及引物建立高效的分子标记辅助选择育种体系，能够在‘惠’后代中高效筛选出具有自花结实性的苹果种质，从而创制自花结实性的苹果品种。

技术领域

本发明涉及生物育种技术领域，具体涉及一种位于苹果12号染色体上与‘惠’苹果自花结实性状相关的SSR分子标记的开发及其应用。

背景技术

苹果是我国的第一大水果，具有极高的营养价值，且深受消费者喜爱，但由于苹果自交不亲和性的存在，在实际生产过程中需要配置与主栽品种S基因不同的品种作为授粉品种，并在花期通过访花昆虫授粉或人工授粉才可以保证产量，这样不但增加了生产成本，也增加了管理难度。而培育具有自花结实能力的苹果品种是实现果树轻简化栽培的有效手段之一，现在生产上常见的自花结实苹果品种较少，仅有‘寒富’，‘惠’，‘CAU-1’等。以这些品种为基础开发合适的与自花结实性相关的分子标记是提高自花结实性育种效率的有效手段。

SSR标记为第二代分子标记，具有多态性高、信息含量丰富、共显性遗传等优点，被广泛应用于植物的种质鉴定、遗传结构分析、遗传连锁图谱构建、QTL定位等方面。有关苹果SSR相关的研究工作已有开展，但目前尚未见运用SSR标记对苹果自花结实性状进行关联分析的研究。

基于DNA测序仪的SSR荧光标记毛细管电泳检测方法可以快速得到定量的DNA片段分析数据，从而开发与‘惠’自花结实性有关的SSR标记并在育种中应用。

发明内容

为高效选育自花结实性苹果种质，本发明的目的在于提供一种‘惠’后代自花结实性的SSR分子标记引物。

本发明的另一个目的在于提供一种试剂盒。

本发明的再一目的在于提供一种快速筛选自花结实性苹果品种的方法。

为达到以上目的，本发明采取的技术方案是：

一种‘惠’后代自花结实性的SSR分子标记引物，所述SSR分子标记为CH04d02，所对应的SSR分子标记的引物为：

Ch04d02F:CGTACGCTGCTTCTTTTGCT，如SEQ ID NO:1所示；

Ch04d02R:CTATCCACCACCCGTCAACT，如SEQ ID NO:2所示。

所述‘惠’后代自花结实性的SSR分子标记引物在筛选自花结实性苹果品种中的应用。

本发明还提供一种试剂盒，包括所述‘惠’后代自花结实性的SSR分子标记引物。

本发明还提供利用上述SSR分子标记引物快速筛选自花结实性苹果品种的方法，包含如下步骤：

1)提取待检测苹果叶片的DNA，

2)以DNA为模板，使用用于鉴定‘惠’后代自花结实性的SSR分子标记引物进行PCR扩增，

3)荧光标记毛细管电泳检测，

4)数据分析

用PROSize 2.0软件生成位点的图谱文件，测出PCR扩增产物长度与荧光强度峰值，获得每个SSR位点的基因型；分析基因分型与自花结实性的关系。

在上述方案的基础上，若SSR位点的基因型表现为114bp：126bp基因型，‘惠’后代自花结实率高。

附图说明

本发明有如下附图：

图1‘惠’自交后代CH04d02基因分型结果。