[发明专利]一种抗双链DNA抗体IgG化学发光免疫测定试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种抗双链DNA抗体IgG化学发光免疫测定试剂盒及其制备方法和应用，所述试剂盒包括生物素化的双链DNA抗原、链亲和素包被的纳米磁微球、异鲁米洛标记的鼠抗人IgG单克隆抗体、化学发光标记物、化学发光底物液、抗双链DNA抗体IgG定标品；所述化学发光标记物为异鲁米洛或异硫氰酸异鲁米洛；所述纳米磁微球为柠檬酸修饰的Fe₃O₄。利用本发明所述抗双链DNA抗体IgG化学发光免疫测定试剂盒进行抗体检测，灵敏度高，重现性好，准确度高，并且成本低，操作简单。

技术领域

本发明属于免疫检测技术领域，涉及一种抗双链DNA抗体IgG化学发光免疫测定试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

双链脱氧核糖核酸(double stranded DNA,dsDNA)抗体是一种能够与天然DNA结合的自身抗体。在绝大多数系统性红斑狼疮(SLE)患者的血清中均存在该抗体，其与SLE的病理变化、活动性、疗效及预后有很密切的关系。

因此，对于抗双链DNA抗体IgG的检测成为SLE诊断、以及病情追踪和预后判断等具有重要意义。

在本领域中，检测抗双链DNA抗体IgG的方法常见的为酶联免疫吸附法，但是其存在一些不足，例如使用的试剂多，操作复杂，并且容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果准确性，采用人工操作，试剂或样品的取用量不是很精确等。

因此，在本领域期望开发一种操作简单、成本低、重现性好、检测灵敏度高的抗双链DNA抗体IgG检测的方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种抗双链DNA抗体IgG化学发光免疫测定试剂盒及其制备方法和应用。利用本发明所述抗双链DNA抗体IgG化学发光免疫测定试剂盒进行抗体检测，灵敏度高，重现性好，准确度高，并且成本低，操作简单。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

一方面，本发明提供一种抗双链DNA抗体IgG化学发光免疫测定试剂盒，所述试剂盒包括生物素化的双链DNA抗原、链亲和素包被的纳米磁微球、异鲁米洛标记的鼠抗人IgG单克隆抗体、化学发光标记物、化学发光底物液、抗双链DNA抗体IgG定标品；

所述化学发光标记物为异鲁米洛或异硫氰酸异鲁米洛；所述纳米磁微球为柠檬酸修饰的Fe₃O₄。

在本发明中，选用异鲁米洛或异硫氰酸异鲁米洛作为化学发光标记物，该化学发光标记物能够产生激发态的产物，这种产物衰变至低能态的同时释放出光子，增强化学发光，从而应用于化学发光免疫分析系统，不需要酶的参与，并且可以提高检测的灵敏度。

优选地，所述纳米磁微球的粒径为50-500nm，例如50nm、80nm、100nm、150nm、180nm、200nm、230nm、250nm、280nm、300nm、350nm、380nm、400nm、450nm、480nm或500nm。

优选地，所述化学发光底物液包括双氧水(H₂O₂)溶液和对苯苯酚溶液。

在本发明中选择双氧水(H₂O₂)溶液和对苯苯酚溶液组成化学发光底物液，能够辅助化学发光标记物提高发光强度和持续时间，得到增强型化学发光。

优选地，所述双氧水溶液的质量百分比浓度为0.01-0.2％，例如0.01％、0.015％、0.02％、0.025％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.12％、0.14％、0.16％、0.18％或0.2％。