[发明专利]北极熊粪便中雌激素的提取方法

说明书

本发明提供一种北极熊粪便中雌激素的提取方法。所述方法包括用提取剂浸提北极熊粪便得到含有雌激素的浸提液的步骤；所述提取剂为乙醇水溶液，所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分比含量可为60％‑100％。通过本发明的方法可最大限度地提取出北极熊粪便中所含的雌激素(雌激素的提取率可达间情期130‑1500pg/g,均值为450pg/g)，本发明操作简单，所用溶剂易得，提取得到的雌激素可用于酶联免疫法等检测方法进行激素含量的测定。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及北极熊粪便中雌激素的提取方法。

背景技术

北极熊(拉丁学名：Ursus maritimus(Phipps,1774)，是熊科熊属的一种动物，是世界上最大的陆地食肉动物，又名白熊。皮肤为黑色，由于毛发透明故外观上通常为白色，也有黄色等颜色，体型巨大，凶猛。

雌性激素是雌性脊椎动物的性激素，具有促进第二性征出现的作用。雌性激素主要有雌二醇、雌三醇、雌酚等，是由卵巢分泌的雌激性素。

及时掌握北极熊雌激素的分泌情况，有利于人们根据雌激素的变化1)指导北极熊合笼的最佳时机；2)判断是否妊娠；3)妊娠过程中跟踪检测保证北极熊能够良好地维持妊娠：4)确定分娩时期并提供保障。

因此对北极熊雌激素分泌水平及时准确地掌握对北极熊的后代繁衍有着极其重大的意义，迫切需要寻找一种能够及时准确地检测北极熊体内雌激素水平的方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何及时准确地了解北极熊体内雌激素水平，为此，本发明的发明人提出了一种从北极熊粪便中提取出粪便中所含的雌激素的方法，以准确掌握北极熊雌激素的分泌情况，从而判断北极熊的身体状况。

本发明所提供的北极熊粪便中雌激素的提取方法，包括用提取剂浸提北极熊粪便得到含有雌激素的浸提液的步骤；

上述方法中，所述提取剂为乙醇水溶液(溶质为乙醇，溶剂为水)，

所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分比含量可为60％-100％；

上述方法中，所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分比含量可为70％-95％；

上述方法中，所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分比含量可为80％-95％；

上述方法中，所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分比含量可为80％；

上述方法中，所述北极熊粪便为雌性北极熊的粪便。

在进行所述浸提前，上述方法还包括对新鲜的雌性北极熊粪便预处理得到北极熊粪便干粉的操作；

具体可为：将收集到的新鲜的雌性北极熊粪便烘干，得到烘干后的粪便，再将所述烘干后的粪便研磨，得到北极熊粪便干粉。

所述烘干在40-60℃下进行，具体可在50℃下进行；

研磨后的北极熊粪便干粉的粒径可为100-150目。

上述方法中，所述浸提可在40-60℃(具体可为60℃)的水浴中震荡条件下进行。

所述浸提可进行多次，如2-4次，具体可进行两次；每次浸提的时间可为10-25min，具体可为20min。

上述方法中，所述浸提进行两次，第一次浸提中，北极熊粪便(干粉)与提取剂(乙醇水溶液)的配比可为：500mg：10-20ml；具体可为500mg：15ml；

第一次浸提完成后，离心收集上清液，向余下的沉淀中加入提取剂进行第二次浸提；

第二次浸提中，所用提取剂与第一次浸提的原料北极熊粪便(干粉)的配比可为5-10ml：500mg；具体可为6ml：500mg。