[发明专利]一种铀酰离子的检测方法有效
| 申请号： | 201911180266.8 | 申请日： | 2019-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN110819697B | 公开（公告）日： | 2023-03-17 |
| 发明（设计）人： | 云雯;吴虹;尤琳烽;熊政委 | 申请（专利权）人： | 重庆工商大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6816 | 分类号： | C12Q1/6816 |
| 代理公司： | 南京中律知识产权代理事务所(普通合伙) 32341 | 代理人： | 沈振涛 |
| 地址： | 404100 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 离子 检测 方法 | ||
1.一种溶液中铀酰离子浓度的检测方法，包括如下步骤：
(1)制备金纳米粒子；
(2)用所述金纳米粒子修饰DNA序列4，DNA序列4一端硫醇化，另一端连接荧光基团，其中，所述DNA序列4具体为：HS-TACCCAAAAAACCTGGCTGCAACTCACTATrAGGAAGAGATGGACGTGACATACGG TACAAAAACCCTA-FAM；
(3)用步骤(2)所得金纳米粒子修饰的DNA序列4制备DNA镊子探针；
(4)将步骤(3)所得DNA镊子探针、适量铀酰离子特异性DNA酶链、待测铀酰离子样品溶液混合，其中所述铀酰离子特异性DNA酶链具体为：CACGTCCATCTCTGCAGTCGGGTAGTTAAACCGACCTTCAGACATAGTGAGT；
(5)检测步骤(4)所得溶液的荧光信号，并利用标准曲线得出样品溶液中铀酰离子的浓度，
其中，步骤(3)中与DNA序列4一起制备DNA镊子探针的还有DNA序列1-3，其中DNA序列1为：TAGGCTTCGTAAGGTCCACATACATACATACACCAGCGAGAATGTTCCGT，DNA序列2为：TAGGGTTTTTGTACCGTACCGACGGAACATTCTCGCTGG，DNA序列3为：TGGACCTTACGAAGCCTAACTAGCCAGGTTTTTTGGGTA。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)具体为：将硫醇化的DNA序列4与金纳米粒子以1：1的摩尔比混合12小时，得到金纳米粒子修饰的DNA序列4。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于步骤(3)具体为：通过在pH 5.5的100mMMES缓冲溶液和300mM NaCl中混合100nM的DNA序列1-4，然后将混合物加热至95℃，并缓慢冷却以形成DNA镊子探针。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(4)具体为：将30nM铀酰离子特异性DNA酶链和待测铀酰离子溶液与DNA镊子在含300mM NaCl的10mM的pH 5.5的MES缓冲溶液中混合，然后在40℃下孵育60分钟。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(5)中荧光信号为492nm激发下500nm至600nm测量的荧光信号。
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