[发明专利]蜕膜NK细胞及其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途

权利要求书

1.蜕膜NK细胞或其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途，其特征在于：

所述蜕膜NK细胞的表面标志物为CD56^brightCD16^-CD49a⁺，所述细胞亚群包括CD56^brightCD16^-CD49a⁺CD39⁺蜕膜NK细胞群、CD56^brightCD16^-CD49a⁺CD27⁺蜕膜NK细胞群、CD56^brightCD16^-CD49a⁺CD160⁺蜕膜NK细胞群、CD56^brightCD16^-CD49a⁺TIGIT⁺蜕膜NK细胞群、和CD56^brightCD16^-CD49a⁺CD39⁺TIGIT⁺蜕膜NK细胞群中的一种或几种，

所述不孕不育相关疾病治疗药物为治疗子宫内膜损伤的药物、治疗母胎免疫耐受障碍相关性疾病的药物或子宫内膜损伤时提高受孕率的药物。

2.根据权利要求1所述的蜕膜NK细胞或其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途，其特征在于：

其中，所述治疗子宫内膜损伤的药物为促进子宫内膜厚度增加的药物、增强子宫内膜基质细胞活力的药物、降低子宫内膜细胞损伤的药物、促进子宫内膜基质细胞VEGF表达的药物、维持子宫内膜基质细胞干性和刺激增殖药物中的任意一种或多种组合；

所述治疗母胎免疫耐受障碍相关性疾病的药物为维持或增强免疫耐受性作用的药物、降低自发性流产的药物、以及提高T辅助淋巴细胞水平的药物的任意一种或多种组合；

所述子宫内膜损伤时提高受孕率的药物为降低子宫内膜纤维化程度或提高分泌腺体数量的药物。

3.根据权利要求2所述的蜕膜NK细胞或其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途，其特征在于：

其中，所述维持子宫内膜基质细胞干性和刺激增殖药物为提高基质细胞ALDH和Ki67阳性率的药物；

所述维持或增强免疫耐受性作用的药物为介导DC细胞分泌IL-10的药物。

4.根据权利要求1～3任一项所述的蜕膜NK细胞或其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途，其特征在于，该细胞及细胞亚群的制备方法如下：

A、分离蜕膜NK细胞和蜕膜NK细胞亚群

将蜕膜组织经胶原酶Ⅳ以及DNaseⅠ酶解消化后获取细胞悬液，而后通过密度梯度离心法得到淋巴细胞，然后利用anti-CD56抗体、anti-CD16抗体和anti-CD49a抗体，从中分离标志物为CD56^brightCD16^-CD49a⁺的蜕膜NK细胞；再根据需要利用anti-CD39抗体，anti-CD27抗体，anti-CD160抗体和anti-TIGIT抗体，分离蜕膜NK细胞亚群；

B、NK细胞体外培养

将NK细胞或细胞亚群转移至CTS AIM-V培养基，1640培养基或DMEM培养基中，37℃、5％CO₂环境中培养时间为12-24小时。