[发明专利]新型EED-EZH2相互作用小分子抑制剂的确定和评价

说明书

本发明涉及图1所示的化合物35作为靶向EED底部的EED‑EZH2相互作用小分子抑制剂的用途，及其在制备预防和/或治疗恶性淋巴瘤的药物中的用途。所述恶性淋巴瘤为弥漫性大B细胞淋巴瘤相关的疾病。

技术领域

本发明属于医药领域，涉及图1所示的化合物35作为EED-EZH2相互作用的小分子抑制剂的用途及其在制备预防和/或治疗恶性淋巴瘤的药物中的用途。

背景技术

组蛋白的甲基化是介导多种基本细胞过程的重要表观遗传修饰之一。多梳抑制复合物2 (Polycomb Repressive Complex 2，即PRC2)具有组蛋白甲基转移酶活性，可催化组蛋白H3第27位赖氨酸的三甲基化，在胚胎发育、干细胞可塑性和细胞分化等多种生物学进程中发挥重要的调节作用。PRC2由E2H2、EED和SUZ12三个关键亚基构成，E2H2是催化亚基，与EED和SUZ12形成复合物后发挥作用，EED或SUZ12的缺失都会使PRC2失活。

大量研究表明，PRC2核心组分的活性异常与多种疾病密切相关，尤其是恶性肿瘤的侵袭、发生和发展。在多种人类癌症中，如乳腺癌、前列腺癌、肝癌、大肠癌、神经胶质瘤、淋巴瘤，EZH2、EED和SUZ12表达水平显著升高，而EZH2的下调可以显著抑制这些肿瘤细胞的增殖。因此，PRC2是一种非常有前景的抗肿瘤靶点。

靶向EZH2或EED-EZH2蛋白-蛋白相互作用(PPI)是目前研发PRC2抑制剂的两种策略。在已报道的EZH2抑制剂中，GSK126、EPZ6438和CPI-1205已进入临床试验。然而，一方面，由于EZH2抑制剂直接作用于其天然底物S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的结合位点，而人体内超过50种甲基转移酶中都有类似的SAM结合口袋，因而，需要花费大量的实验资源去检测化合物对其他同源蛋白的选择性；另一方面，EZH2需要与EED和SUZ12形成复合物后才能发挥催化活性，因而，通过抑制EZH2与其辅助蛋白（如EED）的相互作用也可以抑制EZH2的催化活性，同时，由于EZH2蛋白-辅助蛋白相互作用位点的特异性远高于其与SAM结合位点的特异性，故靶向蛋白-蛋白相互作用的位点抑制剂可以解决该化合物的选择性难题。2013年，哈佛医学院的WoojinKim等人根据EZH2与EED的复合物晶体结构，设计合成了一种EZH2环肽类化合物(stapled peptide)，选择性抑制EZH2与EED的结合，促进PRC2多个组分的降解，进而抑制其甲基转移酶活性。相比EZH2抑制剂，该环肽类化合物不仅对依赖EZH2催化活性的肿瘤细胞有杀伤作用，更重要的是，对一些虽然依赖EZH2但是不依赖其甲基转移酶活性的肿瘤细胞（如基底样恶性乳腺癌、雄激素抵抗性恶性前列腺癌等）具有明显的增殖抑制作用，因而，极大地扩大了PRC2复合物抑制剂的应用范围。然而，由于多肽类化合物通常存在细胞渗透能力低、代谢稳定性差和制备昂贵等缺点，其在临床上的使用受到了严重的制约。与此相反，小分子化合物具有通透性好、代谢稳定性高和制备难度低等特点，有效弥补了多肽类化合物的不足。因此，特异性靶向EED-EZH2相互作用的高活性、高成药性小分子抑制剂具有更广阔的临床应用前景，可以为多种依赖于EZH2的恶性肿瘤的治疗提供有力的理论支撑。

EED与EZH2的相互作用界面（顶部和底部）均可以作为PPI抑制剂的靶点。诺华制药公司的研究员已经发现了多个靶向EED顶部的PPI抑制剂并确定了共晶复合物结构，而目前，靶向EED底部的PPI抑制剂却很少。

综上所示，本领域迫切需要开发靶向EED底部的PPI小分子抑制剂。

发明内容

本发明的发明人为解决上述难题，通过虚拟筛选结合生物学评价，发现了一种靶向EED底部的新型EED-EZH2相互作用小分子抑制剂，并测定了其对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系Toledo细胞的抗增殖活性。由此本发明的一个目的在于提供一种新型EED-EZH2相互作用小分子抑制剂——化合物35，如图1所示。

本发明的另一个目的在于提供图1所示的化合物35在制备预防和/或治疗恶性淋巴瘤的药物中的用途。