[发明专利]一种基于模拟酶测定痕量过氧化氢的方法

说明书

本发明公开了一种基于模拟酶测定痕量过氧化氢的方法。于11支比色管中，分别加入B‑R缓冲液、β‑CD‑FeC₄Pc混合液、OP溶液和 OPD溶液，依次加入0.0、0.0001、0.001、0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.1、0.12、0.14mL 8.0×10^‑6mol/L H₂O₂溶液，水浴反应20分钟，再分别加入纳米金溶液，10分钟后稀释至5mL，于荧光光度计上以λex=λem的方式扫描散射光谱。在700nm处分别测定加有H₂O₂溶液的散射强度I_700nm和不加H₂O₂的试剂空白的散射强度I₀，计算差值ΔI_700nm=I_700nm‑I₀。本发明测定方法选择性好、灵敏度高。

技术领域

本发明涉及痕量过氧化氢的测定方法，特别是基于β-环糊精、聚乙二醇辛基苯基醚、四羧基铁酞菁三者形成的复合物为模拟酶测定过氧化氢的共振散射光谱法。

背景技术

过氧化氢作为一种强氧化剂，具有杀菌、消毒、漂白等功能，在医药、食品、化工等行业应用广泛。大气及雨水中过氧化氢普遍存在，是酸雨形成的主要原因。因此，对过氧化氢的检测具有重要的意义。共振散射光谱法因具有操作简单、灵敏度高、检出限低等优点，已被用于很多物质的分析中，在测定过氧化氢方面也逐渐有一些报道。四羧基铁酞菁(FeC₄Pc)是一种过氧化物模拟酶，它可催化过氧化氢氧化邻苯二胺(OPD)生成中间产物2,3-二氨基-5,10-二氢吩嗪和最终产物2,3-二氨基吩嗪，2种产物均可诱导纳米金发生聚集，使体系的共振散射强度增强。在反应体系中加入β-环糊精(β-CD)和聚乙二醇辛基苯基醚(OP)后，FeC₄Pc与β-CD、OP生成OP-β-CD-FeC₄Pc复合物，可改变模拟酶在催化反应中的微环境，进一步提高模拟酶的催化活性。根据反应前后体系共振散射强度的变化可建立一种定量测定痕量过氧化氢的新方法，此方法目前未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种以β-环糊精、聚乙二醇辛基苯基醚、四羧基铁酞菁三者形成的复合物为模拟酶测定过氧化氢的共振散射光谱法。

具体步骤为：

(1)将β-CD饱和溶液与浓度为1.0×10^-6mol/L的FeC₄Pc按体积比为1:3的比例混合均匀，放置12小时，得β-CD-FeC₄Pc混合溶液。