[发明专利]一种醇脱氢酶突变体及其应用有效

专利信息
申请号: 201911175255.0 申请日: 2019-11-26
公开(公告)号: CN110982799B 公开(公告)日: 2021-05-28
发明(设计)人: 倪晔;戴威;许国超;周婕妤;韩瑞枝;董晋军 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/04 分类号: C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/18;C12P17/12;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 林娟
地址: 214000 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 脱氢酶 突变体 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种醇脱氢酶突变体,其特征在于,所述醇脱氢酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的醇脱氢酶的第36位赖氨酸突变为异亮氨酸、第132位苏氨酸突变为天冬氨酸、第159位天冬酰胺突变为天冬氨酸、第210位赖氨酸突变为谷氨酸、第248位苏氨酸突变为丙氨酸和第272位谷氨酰胺突变为亮氨酸得到的。

2.编码权利要求1所述醇脱氢酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。

4.如权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的载体为pET-28a(+)质粒、pET-28b(+)质粒或pET-20b(+)质粒。

5.携带权利要求2所述基因或权利要求3或4所述重组质粒的宿主细胞。

6.权利要求1所述醇脱氢酶突变体的制备方法,其特征在于,所述方法为将权利要求5所述的宿主细胞接种至发酵培养基中进行发酵,获得发酵液;将发酵液进行离心,收集菌体;将菌体进行破碎后离心,获得细胞破碎上清液;将细胞破碎上清液进行提取,获得权利要求1所述的醇脱氢酶突变体。

7.一种生产手性双芳基醇的方法,其特征在于,所述方法为将权利要求1所述的醇脱氢酶突变体添加至含有潜手性双芳基酮的反应体系中进行反应,得到反应液;将反应液进行提取,获得手性双芳基醇。

8.如权利要求7所述的一种生产手性双芳基醇的方法,其特征在于,所述反应体系中还含有辅酶和辅酶循环系统;所述辅酶循环系统含有D-葡萄糖和葡萄糖脱氢酶,或者,含有亚磷酸盐和亚磷酸盐脱氢酶,或者,含有甲酸和甲酸脱氢酶,或者,含有乳酸和乳酸脱氢酶,或者,含有甘油和甘油脱氢酶。

9.权利要求1所述醇脱氢酶突变体,或权利要求2所述基因,或权利要求3或4所述重组质粒,或权利要求5所述宿主细胞,或权利要求6所述制备方法在生产手性双芳基醇中的应用。

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