[发明专利]一种从空气中分离禾谷镰刀菌复合种的选择性培养基

说明书

本发明公开了一种从空气中分离禾谷镰刀菌复合种的选择性培养基，该培养基是向PDA培养基中添加毒黄素、恶霉灵、乙磷铝、五氯硝基苯和利福平；实验证明，用本发明的选择性培养基可分离空气中禾谷镰刀菌复合种，出现禾谷镰刀菌酒红色特征菌落，可解决与其它镰刀菌不易区分，分离过程中各种非目标真菌和细菌污染严重的问题，本发明的选择性培养基具有可行性、准确性高、实用快捷、制备简便的特点。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种简便、快速分离空气中禾谷镰刀菌复合种的选择性培养基。

背景技术

Fusarium Head Blight(FHB)是一种全球小麦和大麦的毁灭性病害。这种病害不仅会造成严重的产量损失，还会导致食品和饲料行业使用的谷物真菌毒素污染，造成巨大的间接损失。在中国，禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)和亚洲镰刀菌(Fusariumasiaticum)是引起麦类赤霉病的主要病原菌，占分离比例的90％以上，称为禾谷镰刀菌复合种群(Fusarium graminearum Species Complex，FGSC)；美洲和欧洲的主要病原菌是禾谷镰刀菌(F.graminearum)。禾谷镰刀菌在其生命周期中经历无性和有性阶段(Gibberrllazeae)。无性阶段产生分生孢子，而有性阶段产生子囊孢子，这种子囊孢子是在深黑色子实体中产生的，称为子囊果(Perithecia)。分生孢子和子囊孢子都可以引发小麦植株感染(Shaner,2003)，其中子囊孢子是引发赤霉病主要初侵染源。

在自然界中，赤霉病菌的有性阶段发生在作物后期成熟阶段，通常在玉米和小麦秸秆的表面上形成子囊果，例如玉米茬、水稻茬等。子囊孢子可以从成熟的子囊中弹射而出，并通过风飞散以侵染小麦；这个过程正与生长季节的大小麦开花期同时发生，因而来自于田间病残体上的子囊果是小麦赤霉病最主要的初侵染源。监测田间子囊孢子数目可以为病害流行与发生提供科学数据，再结合气象资料可预测预报该病害发生的流行趋势。

目前，从发病麦穗(粒)上分离小麦赤霉病菌的方法和技术比较成熟与容易，现有技术中已有一些从土壤或寄主植物和种子中分离镰刀菌的报道。例如张艺萍发明了“一种从土壤中分离尖孢镰刀菌的方法”的培养基，使用了青霉素、链霉素、利福平和杀真菌剂五氯硝基苯作为选择性培养基分离尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schlechtend Fr.)的配方，这种方法可以很好的分离大多数的镰刀菌(CN 103074238A)；景晓辉等(2009)介绍了一种简便分离香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)的选择性培养基，这种培养基无需无菌操作，可以从土壤中分离出香蕉枯萎病菌，菌落典型，是一种较为理想的选择性培养基。利用上述的培养基虽然也可以分离空气中镰刀菌，但空气中镰刀菌的种类非常丰富，而造成小麦赤霉病的主要是禾谷镰刀菌和亚洲镰刀菌，用上述培养基分离到更多的是非禾谷镰刀菌复合种群，如何找到一种能够快速鉴别出禾谷镰刀菌和亚洲镰刀菌的分离方法和培养基，是本发明的技术难点。

对病害发生进行预测预报，是防控植物病害的一种有效手段。小麦赤霉病是一种气传性病害，田间子囊孢子是其最主要的初侵染源，如果能够监测子囊孢子的数量，则可以对赤霉病的发生进行预测预报。基于这个目的，本发明研究监测空气中子囊孢子量的方法和选择性培养基。而目前现有技术没有在病害发生前对子囊孢子进行监测的方法，都是在病害发生后进行病样的分离和培养。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种从空气中分离禾谷镰刀菌复合种的选择性培养基，该选择性培养基中含有毒黄素、恶霉灵、乙磷铝、五氯硝基苯、利福平，使用该培养基可以快速从空气中分离到禾谷镰刀菌复合种，并可解决与其它镰刀菌不易区分、分离过程中各种非目标真菌和细菌污染严重的问题。