[发明专利]一种用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法

权利要求书

1.一种用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，包括：

(1)将牛血清白蛋白与CB缓冲液混合得到混合液，调节混合液的pH值为7～9，再加入甲基丙烯酸酐进行反应，最后经后处理得到中间产物，记为BSA-MA；

反应过程中维持反应液的pH值为7.5～9；

(2)将步骤(1)制备的BSA-MA溶于PBS缓冲液中，得到溶液A；将光引发剂溶于乙醇溶液中，得到溶液B，将溶液A与溶液B混合得到水凝胶前体溶液；

(3)将步骤(2)制备的水凝胶前体溶液浇铸到模具中，经紫外光交联固化后得到所述用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶。

2.根据权利要求1所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：

所述CB缓冲液为碳酸盐/碳酸氢盐缓冲液，由碳酸盐与碳酸氢盐溶于水中制备得到。

3.根据权利要求1所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：

所述CB缓冲液为碳酸钠/碳酸氢钠缓冲液，浓度为0.25mol/L；

所述混合液中，牛血清白蛋白的浓度为5～15g/100mL；

所述甲基丙烯酸酐与牛血清白蛋白的摩尔比为0.55～4.4。

4.根据权利要求1所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：

调节反应体系混合液的pH值为9，并在反应过程中维持反应液的pH值为7.5～9。

5.根据权利要求1所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：

所述后处理包括过滤、透析和冷冻干燥。

6.根据权利要求1所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(2)中：

所述溶液A中，BSA-MA的浓度为5～30g/100mL；

所述溶液B中，光引发剂的浓度为5～30g/100mL；

所述水凝胶前体溶液中，光引发剂的浓度为0.05～1g/100mL。

7.根据权利要求1所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述光引发剂选自2-羟基-4'-(2-羟基乙氧基)-2-甲基丙酚、2,4,6-三甲基苯甲酰基次膦酸苯基锂、2,2′-偶氮双[2-甲基-N-(2-羟乙基)丙酰胺]、2-(2,4,5,7-四溴-6-氧化-3-氧代-3氧杂蒽酮-9-基)苯甲酸酯中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述紫外光交联固化的时间为5～15min。

9.根据权利要求1～8任一权利要求所述的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中：

所述混合液中，牛血清白蛋白的浓度为10g/100mL；

所述甲基丙烯酸酐与牛血清白蛋白中游离氨基的摩尔比为1.1～2.2：1；

步骤(2)中：

所述溶液A中，BSA-MA的浓度为10～20g/100mL；

所述水凝胶前体溶液中，光引发剂的浓度为0.1～0.5g/100mL。

10.一种根据权利要求1～9任一权利要求所述的方法制备的用于细胞和组织培养的高取代白蛋白甲基丙烯酰基水凝胶。