[发明专利]采用HSCCC制备酸枣仁中高纯度皂角黄苷和文赛宁Ⅱ的方法

说明书

本发明提供一种采用HSCCC制备酸枣仁中高纯度皂角黄苷和文赛宁Ⅱ的方法，该方法包括将酸枣仁用醇溶液溶解，浸泡，超声提取，提取液脱脂后，浓缩，干燥，获得总黄酮粗品；利用HSCCC方法采用第一套溶液体系和第二套溶液体系对总黄酮粗品进行分离提纯，制备皂角黄苷和文赛宁Ⅱ；本发明提供的方法可以高纯度地制备皂角黄苷和文赛宁Ⅱ。

技术领域

本发明属于有效成分制备领域，特别涉及一种采用HSCCC制备酸 枣仁中高纯度皂角黄苷和文赛宁Ⅱ的方法。

背景技术

当今社会快速发展，人们的工作生活压力越来越大，随之产生的 焦虑、失眠等症状也不断地困扰着人们的正常生活，失眠人群在成年 人中非常普遍，长期的失眠是诱发抑郁症、加速衰老、降低机体免疫 力诱发癌症等的主要诱因之一。目前用于失眠的镇静、催眠类药物主 要有巴比妥类(苯巴比妥等)、苯二氮卓类(地西泮等)、吡咯酮类非苯 二氮类(佐匹克隆等)抗失眠症药物，但这些镇静、催眠类化学药物对 中枢神经系统有明显的不良反应，长期使用不但出现耐药性，还有可 能加重病情，进而使患者产生耐受性，最终导致治疗失败，因此，研 究和开发中药类养心安神药调节睡眠，尤其是模拟生理性睡眠的药物 的需求显得日益迫切。有研究证明，酸枣仁对各种病因引起的失眠症 和神经衰弱症均有良好的效果，是经典的镇静催眠中药，并且具有疗 效稳定、安全等优点。目前制备研究较多的是酸枣仁中黄酮、皂苷、 生物碱等单体成分。对于黄酮成分，如皂角黄苷和文赛宁Ⅱ的制备研究很少，这两个组分具有良好的抗氧化活性，并且是酸枣仁镇静安神 的活性部位，具有良好的应用前景，可以开发以这两种组分为主要活 性成分的保健食品，对亚健康人群特别是中老年人改善睡眠、延缓衰 老具有潜在的应用价值。

对于酸枣仁单体的分离纯化制备，方法主要有大孔树脂法、超滤 法、衍生物制备法、凝胶色谱法、硅胶柱色谱和反向硅胶柱色谱法、 高效液相色谱法等，大孔树脂、超滤法、衍生物制备法、凝胶色谱法、 硅胶柱色谱和反向硅胶柱色谱法制得的物质纯度均较低，不能满足高 纯度产品的要求；高效液相色谱法虽然得到的物质纯度较高，但是成 本很高，因色谱柱的不可逆吸附导致单体成分的得率很低。

高速逆流色谱(High Speed Counter-current Chromatography) 技术是上世纪80年代发展起来的一项液液分离技术。尚远宏等在期刊 文献《应用高速逆流色谱分离天然产物中成分的研究进展》中介绍了 应用乙酸乙酯-正丁醇-水(3:2:5)的溶剂体系分离酸枣仁黄酮碳苷的 报道，该体系无法制备出纯度高的皂角黄苷和文赛宁Ⅱ，且现有技术 尚未见采用HSCCC制备酸枣仁中高纯度皂角黄苷和文赛宁Ⅱ的报道。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种采用HSCCC制备酸枣 仁中高纯度皂角黄苷和文赛宁Ⅱ的方法。

本发明其中一个方案提供一种采用HSCCC制备酸枣仁中高纯度皂 角黄苷和文赛宁Ⅱ的方法，该方法包括如下步骤：

(1)提取物的制备：将酸枣仁用醇溶液溶解，浸泡，超声提取， 提取液用正丁醇萃取，将正丁醇层浓缩，干燥，获得总黄酮粗品；

(2)HSCCC分离制备：利用HSCCC方法采用第一套溶液体系和 第二套溶液体系对总黄酮粗品进行分离提纯，制备皂角黄苷和文赛宁 Ⅱ。

进一步改进的方案中，所述第一套溶液体系和第二套溶液体系均 由体积比为1-5:1-20:1-5:1-20的C₆～C₈烷-乙酸酯-极性为6.0～6.6的有 机溶剂-水组成；

进一步改进的方案中，所述第一套溶液体系由体积比为 1:3-10:1:3-10的C₆～C₈烷-乙酸酯-极性为6.0～6.6的有机溶剂-水组 成。

进一步改进的方案中，所述第二套溶液体系由体积比为 1:3-10:1:3-10的C₆～C₈烷-乙酸酯-极性为6.0～6.6的有机溶剂-水组 成。