[发明专利]一种小分子探针CMSH以及制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种小分子探针CMSH以及制备方法及应用，该探针母体为香豆素，该小分子探针可实现紫外与荧光精确检测ClO^‑，可以用于检测溶液、活细胞以及斑马鱼中外源性的ClO^‑，本发明合成方法简单，操作方便，不需要苛刻的条件，而且合成产率和纯度都很高，因此在ClO^‑检测方面具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及荧光成像分子探针领域，尤其是涉及一种基于香豆素荧光成像技术检测ClO^-的探针，具体涉及一种分子探针CMSH、其制备方法及应用。

背景技术

在目前为止所设计的分析方法中，荧光成像是检测离子的重要方法。然而，这种方法对样品的要求和工作环境上都有一定的局限性。此外，大多数探针的选择性和灵敏度都存在一定的限制，开发一种高选择性和灵敏性的探针是一种技术的挑战。为了深入了解深层荧光成像的相关信息，开发ClO^-荧光成像成为了一种选择。但是，由于荧光强度大小存在差异，使得荧光成像的最大成像效果不是很理想，这种成像效果难以满足对生物体内进行观察的效果。例如，过量ClO^-也可能导致一些副作用，在少量ClO^-存在下，通过荧光成像难以检测到 ClO^-。因此，开发一种监测ClO^-浓度变化的有效方法非常重要。

最近，已经设计和合成了许多能够特异性鉴定ClO^-的荧光探针，包括一些可以靶向亚细胞器的探针。然而大多数构建的ClO^-探针是荧光增强或淬灭。与这种单发射波长变化的探头相比，比率型探头具有双波长发射特性，受环境因素的影响较小，响应范围广，精度高，可以实现半定量分析，已得到广泛应用。但是由于水溶性差与固有的毒性，目前报道的比率型探针限制了它们在生物中的应用。鉴于此，探究一种新的ClO^-识别的探针具有深远的意义。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种高选择性和高灵敏度的ClO^-识别荧光探针。

为实现上述目的，本发明提供一种小分子探针CMSH，所述分子探针分子式为C₄₀H₃₀N₄O₄，其结构式为：

本发明还提供上述小分子探针CMSH的制备方法，具体包括如下步骤：

向含7-(二乙氨基)-2-氧代-2H-亚甲基-3-甲醛的无水乙醇溶液制备混合溶液的体积摩尔浓度为0.05-0.1mol/L，加入2-羟基苯甲酰肼，混合反应，过滤后用乙醇洗涤得到产物，所述7-(二乙氨基)-2-氧代-2H-亚甲基-3-甲醛和2-羟基苯甲酰肼的摩尔比为：1：1-2。

作为本发明的进一步改进，所述7-(二乙氨基)-2-氧代-2H-亚甲基-3-甲醛和2-羟基苯甲酰肼的摩尔比为1:1

本发明还提供上述小分子探针CMSH检测、识别环境中或生物样品中ClO^-的应用。

作为本发明的一种应用范围，所述小分子探针CMSH利用荧光成像检测正常细胞和细菌中外源性的ClO^-的应用。

作为本发明的一种应用范围，所述小分子探针CMSH利用荧光成像检测斑马鱼体内外源性的ClO^-的应用。

作为本发明的一种应用方式,通过紫外分光光度法，在波长348nm、456nm 处测定ClO离子溶液的吸光度,通过计算A 348nm/A 535nm的吸光度比率来测定ClO^-离子的浓度。