[发明专利]一种高温厌氧长链烷醇醇脱氢酶及其应用在审

专利信息
申请号: 201911162079.7 申请日: 2019-11-25
公开(公告)号: CN110777126A 公开(公告)日: 2020-02-11
发明(设计)人: 王威;宋晓如 申请(专利权)人: 南开大学
主分类号: C12N9/04 分类号: C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70
代理公司: 12207 天津市杰盈专利代理有限公司 代理人: 朱红星
地址: 300457 天津市滨*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 长链烷醇 醇脱氢酶 醇脱氢酶基因 重组表达载体 耐高温 构建 石油污染 氨基酸残基序列 生物治理技术 高温厌氧 降解能力 十六烷醇 宿主细胞 厌氧降解 厌氧条件 应用基础 有效降解 降解 厌氧 蛋白质 应用 诱导 石油 开发
【权利要求书】:

1.一种嗜热的长链烷醇醇脱氢酶,具有如下述氨基酸序列的蛋白质:SEQ ID NO.1。

2.编码权利要求1所述嗜热长链烷醇醇脱氢酶的基因,具有下述核苷酸序列之一:

1)序列表中SEQ ID NO.2的DNA序列;

2)编码序列中SEQ ID NO.1蛋白质序列的多核苷酸。

3.含有权利要求1-2所述基因的表达载体、宿主菌及扩增权利要求1-2所述基因中任一片段的引物。

4.一种权利要求1所述嗜热长链烷醇醇脱氢酶的表达方法,是构建含有嗜热长链烷醇醇脱氢酶基因的重组表达载体,将构建的重组表达载体导入宿主细胞,培养宿主细胞使嗜热长链烷醇醇脱氢酶基因表达,其特征在于:用于构建所含嗜热长链烷醇醇脱氢酶基因的重组表达载体的出发载体为pET-28a(+)。

5.根据权利要求4所述的嗜热长链烷醇醇脱氢酶的表达方法,其特征在于:所述重组表达载体为pET-GTNG_1851

6.根据权利要求6所述的重组表达载体pET-GTNG_1851GTNG_1851基因的扩增方法,其特征在于包含如下步骤:GTNG_1851来自于Geobacillus thermodenitrificans NG80-2;提取Geobacillus thermodenitrificans NG80-2基因组为模板,利用上游引物5’ACGGAATTCATGTACGAGTTATTAGTACCGAA3’ 和下游引物5’ACGCGTCGACTTATAAAGACGCACGCAAAATG3’扩增序列GTNG_1851

7.根据权利要求4所述的嗜热长链烷醇醇脱氢酶的表达方法,其特征:所述宿主为E.coli BL21(DE3);培养所述重组大肠杆菌宿主时加入诱导剂IPTG,所加入的IPTG的浓度为0.1-1mM,诱导温度为25-45℃,诱导时间为3-5小时。

8.权利要求1所述嗜热长链烷醇醇脱氢酶在制备用于石油污染物降解方面的应用。

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