[发明专利]一种便携高通量单细胞外囊泡检测装置及可视化检测方法有效
申请号: | 201911158961.4 | 申请日: | 2019-11-22 |
公开(公告)号: | CN112834754B | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
发明(设计)人: | 陆瑶;朱凤佼;冀雅慧;白雪 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 毛薇;李馨 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 便携 通量 单细胞 外囊泡 检测 装置 可视化 方法 | ||
1.一种便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,所述装置包括高通量单细胞源性细胞外囊泡可视化芯片和可成像的便携设备,所述高通量单细胞源性细胞外囊泡可视化芯片包括两部分,从上到下依次为生物分析基底(1)、高通量微阵列芯片(2);
所述便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,包括如下步骤:
在高通量微阵列芯片上接种细胞,在生物分析基底上滴加生物素化的检测抗体,与被捕获的细胞外囊泡结合;利用免疫金银染色技术,对所捕获的细胞外囊泡染色,利用可成像的便携设备进行检测。
2.根据权利要求1所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,所述生物分析基底(1)为包被有抗体、抗体阵列、DNA、DNA阵列的玻片;所述玻片包括多聚赖氨酸、聚苯乙烯玻片。
3.根据权利要求1所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,高通量微阵列芯片(2)为微孔阵列芯片或者条带阵列芯片。
4.根据权利要求3所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,所述微孔阵列包括正方形阵列、圆形阵列。
5.根据权利要求1所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,所述单细胞外囊泡包括外泌体、癌小体、凋亡小体。
6.根据权利要求1所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,可成像的便携设备包括便携式平板扫描仪。
7.根据权利要求1所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,所述便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,包括如下步骤:
将细胞均匀的接种在高通量微阵列芯片上,盖上孵育过捕获抗体的生物分析基底;用夹具固定生物分析基底与高通量微阵列芯片;将其放入培养箱中孵育;孵育完成后,在生物分析基底上滴加生物素化的检测抗体,与被捕获的细胞外囊泡结合;滴加亲和素化金纳米颗粒,与生物素结合;滴加银染色试剂,完成对所捕获的细胞外囊泡的染色;利用便携式可成像设备记录检测结果,利用图像灰度分析得出结果。
8.根据权利要求7所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,在滴加亲和素化金纳米颗粒前,按照酪胺信号扩增试剂盒进行信号扩增。
9.根据权利要求1所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,细胞接种个数为2×104—8×104个。
10.根据权利要求1所述的便携高通量单细胞外囊泡检测装置的可视化检测方法,其特征在于,用夹具固定后放入培养箱中孵育4-48h。
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