[发明专利]细胞评价用器件以及细胞评价用系统

说明书

在通过细胞的培养而在该细胞间形成紧密连接的细胞评价用器件中，能够容易地对由于该紧密连接的形成而产生的电阻的上升进行确认。提供一种细胞评价用器件(1)，具备：多孔性膜(50)，具有第1主面与第2主面；第1流路(37)，具有与多孔性膜(50)的第1主面中载置有细胞的第1区域(100)相面对的部分即第1流路部(371)；第2流路(77)，具有与多孔性膜(50)的第2主面中位于第1区域(100)的背面侧的第2区域相面对的第2流路部(771)；设置于第1流路部(371)的第1电极(252)以及设置于第2流路部(771)的第2电极(852)，该第1电极(252)以及第2电极(852)以夹着第1区域(100)以及第2区域的方式设置。

技术领域

本发明涉及细胞评价用器件以及具备该细胞评价用器件的细胞评价用系统，特别涉及用于确认在培养细胞时形成于细胞间的紧密连接的状态的器件。

背景技术

在生物体内许多上皮细胞形成紧密连接(tight junction)，该组织涉及吸收、代谢等重要的功能。因此，在各种用于阐明功能的实验前需要确认细胞形成有紧密连接。肠道上皮细胞是形成生物体的肠道的内部表面的细胞。肠道上皮细胞通过在相互的细胞间形成紧密连接来防止微生物或有害物质侵入生物体。以这样的肠道上皮细胞为对象而进行了以恢复肠道的功能等为目的的医药品、食品的开发(例如专利文献1)。

在这样的开发中，首先，培养肠道上皮细胞并在细胞间形成紧密连接。然后，使对象物质作用于形成有紧密连接的肠道上皮细胞，并对细胞的状态变化进行观察。以往，细胞培养插件(cell culture insert)已被广泛用于这样的一系列的处理中。

细胞培养插件将插件悬挂于孔板的孔内。插件的底面由多孔性膜构成。在细胞培养插件中，在插件的内部导入第1培养液、在插件与孔板之间导入第2培养液，并在该多孔性膜上培养细胞。

然后，在插件与孔板之间以及插件的内部分别插入电阻计的电极并对电阻进行测量。在这样测量出的电阻中包含有多孔性膜的电阻与细胞的电阻。在开始培养细胞后，随着形成于细胞间的紧密连接的数量增加，细胞的电阻上升，所测量的电阻值逐渐变高。如果在细胞间形成有充分的紧密连接，则电阻变得不再上升，因此通过确认电阻的测量值成为几乎恒定，从而判断在细胞间已形成有充分的紧密连接。对在细胞间形成有紧密连接的状态进行确认后，导入包含有对象物质的培养液来代替第2培养液，并对细胞的变化进行观察。

近年来，提出有使电极与细胞评价用器件一体化的器件(例如，非专利文献1)。在非专利文献1中记载的细胞评价用器件具有均作为为大致S字状的管的第1流路部件与第2流路部件、以及多孔性膜。第1流路部件与第2流路部件以俯视观察中在上下交叉的方式而相邻配置。在形成于第1流路部件的内部的第1流路与形成于第2流路部件的内部的第2流路交叉的位置配置有多孔性膜。此外，第1流路与第2流路通过形成于多孔性膜的孔而连通。在第1流路部件的流路入口端设置有第1电极，在第2流路部件的流路出口端设置有第2电极。

在细胞评价用器件中，使第1培养液流通于第1流路、第2培养液流通于第2流路并在多孔性膜上培养细胞。此外，对2个电极间的电阻进行测量并对形成于细胞间的紧密连接的状态进行确认。确认了在细胞间形成有充分的紧密连接后，导入包含有对象物质的培养液来代替第1培养液，并对细胞的变化进行观察。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2008-212006号公报

非专利文献

非专利文献1：Odijk M.等，“在器官芯片微型系统中测量直流跨上皮电阻”，《芯片实验室》，15(3)，745-752(2015)

发明内容

发明要解决的技术问题