[发明专利]一种骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的建立方法及其应用

说明书

本申请提供一种骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的建立方法及其应用，本方法以进行双侧卵巢摘除的大鼠为实验对象，腹腔注射D‑半乳糖，同时灌胃AlCl₃，即得到骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型。所述应用为在骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的建立方法在验证药物药效中的应用，其中所述药物包括治疗骨质疏松药物、治疗阿尔茨海默症药物、松果菊苷和毛蕊花糖苷中的一种或几种。本模型的实验周期短，成功率高，成本低，易于复制、应用和推广；满足骨质疏松和阿尔茨海默症动物模型的要求，可以此骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型为研究对象来探究骨质疏松和阿尔茨海默症的并发机制、早期预防和同时治疗，而且还能够用于一药多效药物的发现和筛选。

技术领域

本发明涉及一种动物模型的建立方法及其应用，具体而言，涉及一种骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的建立方法。

背景技术

骨质疏松(Osteoporosis，OP)和阿尔茨海默症(Alzheimer's Disease，AD)是临床中最常见的老年病，且常见并发，其复杂的病理机制一直限制着两种疾病的有效预防和治疗。AD是一种以形成老年斑、神经纤维缠结及神经元丢失为主要病理特征的神经系统退行性疾病。OP是一种以骨密度降低和骨组织微细结构发生退化为特征，以致骨脆性增高及骨折危险性增加的全身性骨病。随着人口老龄化的加剧，OP和AD已成为我国面临的重要公共健康问题。我国OP的总患病率平均为13％，AD患病率可达5～7％，并呈现逐年攀升的趋势，老年、女性均为两病的易感人群。越来越多的研究表明，OP和AD存在一些共同的致病因素和发病机制。传统中医学理论认为“肾主骨，生髓，通于脑”，AD和OP的中医病因病机密切相关，“肾精亏虚，精不生髓，髓失所养”的病机在两病中均有体现，提示“异病同治”的可能。

在临床中，OP和AD的治疗多以药物组合为主，但通常存在疗效不理想、服用剂量大、毒副作用强、药物相互作用未知等问题。

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的建立方法；本发明的第二目的是提供一种骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的建立方法在验证药物药效中的应用。

技术方案：本发明提供一种骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的建立方法，所述方法以进行双侧卵巢摘除的大鼠为实验对象，腹腔注射D-半乳糖，同时灌胃AlCl₃，即得到骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型。

优选地，所述腹腔注射D-半乳糖为双侧卵巢摘除手术后第4周开始注射。

进一步地，所述腹腔注射D-半乳糖的剂量为150mg/kg/天；灌胃AlCl₃的剂量为30mg/kg/天，持续8周。

优选地，所述步骤还包括阿尔茨海默症模型评价和骨质疏松模型评价或骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型的干预验证中的一个或两个，所述阿尔茨海默症模型评价包括Morris水迷宫实验和测定海马组织中乙酰胆碱酯酶活性、乙酰胆碱转移酶活性、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量中的一种或几种；

所述骨质疏松模型评价包括测定血清中骨特异性碱性磷酸酶活性、抗酒石酸酸性磷酸酶活性、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量中的一种或几种，以及子宫组织形态观察、形态计量学检测和骨生物力学检测、Micro-CT检测分析中的一种或几种。

其中，乙酰胆碱酯酶简称为AChE；乙酰胆碱转移酶简称为ChAT；超氧化物歧化酶简称为SOD；丙二醛简称为MDA；骨特异性碱性磷酸酶简称为BALP；抗酒石酸酸性磷酸酶简称为TRAP。

进一步地，所述干预验证为将戊酸雌二醇、盐酸多奈哌齐分别施用于所述骨质疏松合并阿尔茨海默症动物模型，并进行阿尔茨海默症模型评价和骨质疏松模型评价；所述阿尔茨海默症模型评价包括Morris水迷宫实验和测定海马组织中乙酰胆碱酯酶活性、乙酰胆碱转移酶活性、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量中的一种或几种；