[发明专利]一种微生物附着腐蚀金属材料的观测方法

权利要求书

1.一种微生物附着腐蚀金属材料的观测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)将厚度为0.5mm～0.7mm的金属样品打磨后进行机械表面抛光；所述金属样品的材料为碳钢、低合金钢或者含铜钢；

(2)在抛光电压为20V～25V和温度为零下20℃～零下22℃的条件下，将步骤(1)得到的金属样品以高氯酸乙醇溶液为电解液进行电解双喷；

(3)将步骤(2)处理后的金属样品立即用乙醇溶液清洗后无氧干燥；

(4)将盐卤溶解在去离子水中得到盐度为2.8％～3.5％的溶液A，向灭菌冷却后的溶液A中加入海洋微生物及培养基得到海洋微生物溶液；

(5)将步骤(3)处理后的金属样品浸没在步骤(4)的海洋微生物溶液中静置24～72小时；

(6)将步骤(5)处理后的金属样品用PBS缓冲溶液冲洗后于质量分数2.5％～2.7％的戊二醛溶液中浸泡10min～15min；

(7)将步骤(6)处理后的金属样品除去附着液体后用TEM观测。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述海洋微生物为需钠弧菌或者铜绿假单胞菌。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，高氯酸乙醇溶液的质量分数为5％～10％。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，金属样品打磨的方法为逐步使用目数依次增大至2000目的砂纸打磨，机械表面抛光至经金相显微镜观察无划痕，机械表面抛光后进行清洗及无氧干燥，机械表面抛光后清洗的清洗剂为乙醇溶液，机械表面抛光后无氧干燥的方法为氮气吹干。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，无氧干燥后将金属样品真空保存，无氧干燥的方法为氮气吹干。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，海洋微生物溶液的OD值为2.0～4.8，所述培养基为2216E液体培养基。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，灭菌的温度为120～121℃，灭菌的时间为15～20min，灭菌冷却后的温度为20～25℃。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(7)中，步骤(6)处理后的金属样品除去附着液体的方法为：将骤(6)处理后的金属样品依次置于体积分数从50％逐渐增大至100％的乙醇溶液中脱水。