[发明专利]白色念珠菌荧光免疫层析测定试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供一种白色念珠菌荧光免疫层析测定试剂盒及其制备方法，包括检测卡、SD卡和样品稀释液；所述检测卡由一壳体和免疫层析试纸条组成，所述免疫层析试纸条位于壳体内部，包括底板，所述底板上沿其长度方向顺次设置有一样品垫、一结合垫、硝酸纤维素膜和一吸样垫，所述结合垫上固定有荧光微球标记的抗白色念珠菌单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设置有检测T线和质控C线，所述T线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的单克隆抗体，所述C线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的二抗。本发公开的试剂盒检测灵敏度、准确度、精密度均更高，对于动态监测患者病情、预后评估及检测复发、指导临床医生及时作出重要的医学决策均有重要意义。

技术领域

本发明属于微生物免疫检测技术领域，更具体地说，涉及一种白色念珠菌荧光免疫层析测定试剂盒。

背景技术

白色念珠菌是一类腐败物寄生菌，单细胞真菌，是阴道内的正常菌群且生存于健康人的皮肤、黏膜，正常情况下白色念珠菌与机体处于共生状态，不致炎症。但当某种因素破坏其平衡状态，则局部白色念珠菌由酵母菌相转为菌丝相，在局部大量生长繁殖，引起皮肤、黏膜甚至全身念珠菌病，故又称之为条件性致病菌。

念珠菌性外阴阴道炎(VVC)是最常见的妇女外阴阴道炎之一，且易复发，其中，白色念珠菌阴道炎占80～90％，常见于青春期至绝经期前。75％妇女一生中至少患一次VVC。由于念珠菌性阴道炎具有难以根治、易反复的特点，对孕妇的危害更大，可增加胎膜早破、羊水污染、早产以及产时、产后感染等并发症，引发早产、胎儿感染、畸形，威胁母婴健康，因此及时准确地诊断和鉴别念珠菌性阴道炎，采取有效的治疗措施，对于提高国民的健康水平，特别是女性生殖健康水平，具有重要的现实和深远意义。

实验室检查念珠菌的方法有：涂片显微镜镜检(湿片法)；培养法；抗原检测法，如乳胶凝集法、免疫层析法、免疫荧光法；核酸检测法，如PCR。湿片法是临床常规检测方法，培养法是检查念珠菌最为灵敏和特异的方法，但因操作麻烦，耗时长通常不作为常规检测，直接免疫荧光染色及核酸检测方法需相应仪器设备及对操作人员的技术要求而限制其使用。目前，已有公司开发出检测白色念珠菌的试剂盒，但均为定性检测，且所用样本稀释液无法使检测目标物良好的分散开来，导致检测误差大、重复性差。

中国专利CN107132353A公开了一种B族链球菌的检测试剂盒及其制备方法，虽然也能给出定量检测结果，但是其采用ABS系统，制备工艺复杂，且需要两株抗体分别标记，有两个结合垫，两个样本处理液，使用时需要按比例混合，系统误差大，不利于CV的控制。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种检测误差小，准确度高的白色念珠菌荧光免疫层析测定试剂盒。

本发明的第二个目的在于，提供一种检测误差小，准确度高的白色念珠菌荧光免疫层析测定试剂盒的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供了一种白色念珠菌荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于，包括检测卡、SD卡和样品稀释液；

所述检测卡，由一壳体和免疫层析试纸条组成，所述免疫层析试纸条位于壳体内部，包括底板，所述底板上沿其长度方向顺次设置有一样品垫、一结合垫、硝酸纤维素膜和一吸样垫，所述结合垫上固定有荧光微球标记的抗白色念珠菌单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设置有检测T线和质控C线，所述T线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的单克隆抗体，所述C线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的二抗；

所述SD卡内存储有标准曲线，采用平板计数法与光密度法关系曲线建立定标方式，使用定标浓度与仪器信号值关系曲线建立标准曲线，实现定量检测；

所述样品稀释液包括磷酸盐缓冲液和玻璃珠。

作为一个优选方案，所述结合垫制备时白色念珠菌单克隆抗体与荧光微球质量比为0.3～0.7:10。