[发明专利]利用RP-HPLC法同时快速检测苯乳酸和4-羟基苯乳酸含量的方法

权利要求书

1.利用RP-HPLC法同时快速检测苯乳酸和4-羟基苯乳酸含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤a：配制流动相，过滤，脱气，调节仪器，平衡色谱柱；

步骤b：配制不同稀释倍数的苯乳酸和4-羟基苯乳酸标准溶液，采用高效液相色谱仪对苯乳酸和4-羟基苯乳酸标准溶液进行高效液相色谱分析，利用离线数据处理软件进行数据处理，确定出峰时间，采用外标法，以苯乳酸和4-羟基苯乳酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线，绘制苯乳酸含量-峰面积标准曲线和4-羟基苯乳酸含量-峰面积标准曲线，得出标准曲线回归方程；

步骤c：将含有苯乳酸和4-羟基苯乳酸的乳酸菌发酵液样品溶液适度稀释，8000～10000r/min离心2～4min，离心后经过0.22μm微滤，采用与步骤b中标准溶液完全相同的色谱条件进行高效液相色谱分析，根据峰面积，按照步骤b的标准曲线回归方程，利用外标法计算出苯乳酸和4-羟基苯乳酸的含量；

步骤b中，所述色谱柱为规格为4.6×250mm，5μm的C18色谱柱，色谱条件如下：

流动相：流动相A为质量分数0.1％甲酸/水溶液，流动相B为乙腈，且所述流动相A和B的体积比为80：20；

流动相流速：0.5mL/min；

检测波长：210nm；

色谱柱温：20～30℃；进样量：10μL。