[发明专利]一种构建人源化鼠肿瘤模型及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201911126695.7 | 申请日： | 2019-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN110934107B | 公开（公告）日： | 2021-12-03 |
| 发明（设计）人： | 徐洋;陈渠;付雪梅 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第八医院(深圳福田);南方医科大学 |
| 主分类号： | A01K67/027 | 分类号： | A01K67/027 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 颜希文 |
| 地址： | 518000 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 构建 人源化鼠 肿瘤 模型 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种人源化鼠肿瘤模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)构建免疫系统人源化鼠：对重度免疫缺陷小鼠以亚致死剂量X射线进行辐照，并移植人胸腺组织以及同源肝CD34+造血干细胞；
(2)检测步骤(1)构建的小鼠的外周血、外周免疫器官和中枢免疫器官中的免疫细胞；
(3)将人永生化肿瘤细胞系或病人来源的肿瘤组织植入步骤(1)的免疫系统人源化鼠，获得人源化鼠肿瘤模型；
所述人源化鼠肿瘤模型的制备方法，还包括使用CAR-T细胞治疗方法来评价人源化鼠肿瘤模型的免疫响应程度；
所述CAR-T细胞治疗方法通过以下方法实现：首先构建抗原表达肿瘤细胞和对应CAR-T细胞；然后检测CAR-T在人源化鼠肿瘤模型中的响应程度；
所述构建抗原表达肿瘤细胞通过以下方法实现：首先利用转基因技术将表达人源CD19基因载体导入肿瘤细胞中，通过嘌呤霉素筛选获得表达CD19单克隆肿瘤细胞，其中人源CD19基因包含SEQ ID NO:1所示的序列；然后利用慢病毒载体构建CAR-T细胞，其中CAR基因编码的人工嵌合蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。
2.如权利要求1所述的人源化鼠肿瘤模型的制备方法，其特征在于，还包括检测所述步骤(3)人源化鼠肿瘤模型的免疫微环境评价指标。
3.如权利要求1所述的人源化鼠肿瘤模型的制备方法，其特征在于，所述检测CAR-T在人源化鼠肿瘤模型中的响应程度通过下方法实现：检测CAR-T细胞对人源化鼠肿瘤模型的抑制能力、T细胞浸润能力、肿瘤清除能力以及T细胞的状态。
4.如权利要求1所述的制备方法构建的人源化鼠肿瘤模型在免疫治疗评价方法中的应用。
5.如权利要求1所述的制备方法构建的人源化鼠肿瘤模型在免疫治疗评价系统中的应用。
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