[发明专利]一种鉴定或辅助鉴定待测天麻为红天麻、乌天麻还是红乌杂交天麻的方法

说明书

本发明公开了一种鉴定或辅助鉴定待测天麻为红天麻、乌天麻还是红乌杂交天麻的方法。该方法为：分别采用引物对W291和引物对H255对待测天麻的基因组DNA进行PCR扩增，根据PCR扩增结果进行判断。实验证明，本发明提供的方法能够快捷、准确的鉴定或辅助鉴定待测天麻为红天麻、乌天麻还是红乌杂交天麻，对红天麻、乌天麻和红乌杂交天麻的临床用药安全和栽培具有重要意义。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鉴定或辅助鉴定待测天麻为红天麻、乌天麻还是红乌杂交天麻的方法。

背景技术

天麻为兰科植物天麻(Gastrodiaelata BL.)的干燥块茎，具有息风止痉，平抑肝阳，祛风通络的功效。研究表明，天麻含有酚类、有机酸、多肽等多种化学成分，具有益智、脑保护、镇痛、镇静催眠、抗癫痫、抗晕眩、降压、降血脂、抗氧化、保肝、抗肿瘤和增强免疫力等多种药理作用。天麻为我国名贵中药材，近年来市场需求量日益上涨，野生天麻已经不能满足市场需求，目前天麻中药材全部为栽培天麻。

天麻属植物约20种，我国有13种，其中天麻种以下划分了红天麻(原变型)、乌天麻、绿天麻、黄天麻和松天麻等5个变型。红天麻种子发芽率和产量高，适应性和耐旱性都强。乌天麻块茎含水量低且干品品质好。红乌杂交天麻是用红天麻和乌天麻杂交而成，集合了父母系的优点：抗病虫害力强、适种温度广、天麻形态好、产量高、天麻素含量比乌天麻高，比红天麻高出一倍多。另外，红天麻和乌天麻的天麻素和多糖的含量也较高，因此，常将红天麻、乌天麻和红乌杂交天麻作为栽培的优良品种。虽然大范围的人工栽培在一定程度上解决了天麻的市场需求问题，但也产生了天麻种质的混乱问题。目前，对于天麻的鉴定大部分还停留在传统鉴定方法上，即通过观察茎秆颜色鉴定天麻。然而传统鉴定方法不仅难度大、费时，而且准确度不高。因此，建立一种快速、准确的鉴别红天麻、乌天麻和红乌杂交天麻的方法对栽培育种和鉴定市售天麻真伪性具有重要意义。

聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，其最大特点是能将微量的DNA大幅增加，具有简便快速、准确度高、特异性强的优点。

发明内容

本发明的目的为鉴定或辅助鉴定待测天麻为红天麻、乌天麻还是红乌杂交天麻。

本发明首先保护引物组合，可包括引物对W291和引物对H255；

引物对W291可由引物W291-F和引物W291-R组成；

引物W291-F的核苷酸序列可如SEQ ID No：2所示；

引物W291-R的核苷酸序列可如SEQ ID No：3所示；

引物对H255可由引物H255-F和引物H255-R组成；

引物H255-F的核苷酸序列可如SEQ ID No：5所示；

引物H255-R的核苷酸序列可如SEQ ID No：6所示。

所述引物对W291中，引物W291-F和引物W291-R的摩尔比可为1:1。

所述引物对H255中，引物H255-F和引物H255-R的摩尔比可为1:1。

所述引物组合具体可由引物对W291和引物对H255组成。

本发明还保护所述引物组合的应用，可为如下a1)-a4)中的任一种：

a1)鉴定或辅助鉴定待测天麻为红天麻、乌天麻还是红乌杂交天麻；

a2)鉴定或辅助鉴定待测样品中是否含有红天麻、乌天麻或红乌杂交天麻；

a3)制备用于鉴定或辅助鉴定待测天麻为红天麻、乌天麻还是红乌杂交天麻的试剂盒；