[发明专利]一种快速检测焦糖色中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量的方法

说明书

本发明涉及分析检测技术领域，提供了一种快速检测焦糖色中2‑甲基咪唑和4‑甲基咪唑含量的方法。本发明利用水将焦糖色溶解，然后基于氯甲酸异丁酯可以在水环境中对甲基咪唑进行衍生、且衍生物溶于正己烷的特点，将甲基咪唑与水溶性焦糖色快速分离，然后使用气相色谱‑质谱法测定。本发明的方法样品前处理简单，焦糖色溶于水后无需净化处理，直接即可进行衍生化，进一步检测分析。本发明的样品前处理过程中有机溶剂用量仅为2mL左右，样品前处理时间仅为10min左右，可以同时进行大批量样品的快速检测，本发明的方法具有快速、简便、灵敏度高的特点。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，特别涉及一种快速检测焦糖色中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量的方法。

背景技术

焦糖色是食用色素中用量最大、使用范围最广的天然食品添加剂之一，我国GB2760《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中规定除个别产品外，大多数可以按生产需要适量使用，它可以显著改进食品的色泽和风味等感官品质，应用于糖果、饼干、调味品、饮料等。根据GB1886.64《食品安全国家标准食品添加剂焦糖色》，焦糖色制备工艺分为普通法焦糖色(Ⅰ型)、苛性亚硫酸盐法焦糖色(Ⅱ型)、氨法焦糖色(Ⅲ型)和亚硫酸铵法焦糖色(Ⅳ型)，且GB 2760《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》分别规定四种焦糖色的使用范围和使用量。

2011年国际肿瘤研究机构(IARC)将甲基咪唑类化合物认定为2B类致癌物，人体若过量摄入有引起惊厥甚至引发癌症的风险。普通法焦糖色(Ⅰ型)、苛性亚硫酸盐法焦糖色(Ⅱ型)生产的焦糖色不含2-甲基咪唑和4-甲基咪唑，而当前国内外大部分厂家生产的氨法焦糖色(Ⅲ型)和亚硫酸铵法焦糖色(Ⅳ型)都是使用“氨类化合物”作为催化剂，由糖、氨水或亚硫酸铵在高压高温下产生化学作用而成，会产生致癌物质2-甲基咪唑和4-甲基咪唑，因此GB1886.64《食品安全国家标准食品添加剂焦糖色》规定氨法焦糖色(Ⅲ型)和亚硫酸铵法焦糖色(Ⅳ型)中4-甲基咪唑的含量不得超过200mg/kg。

焦糖色中2-甲基咪唑、4-甲基咪唑含量检测方法有分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法，气相色谱质谱联用法和液相色谱-串联质谱法等。目前的分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法均需要使用大量有机溶剂进行液液萃取，且灵敏度比较低、定性特异性差；液相色谱-串联质谱法仪器设备贵，难以普及。气相色谱质谱联用法定性定量准确，但目前报道的方法仍存在需要的大量溶剂提取、样品前处理方法复杂、检测时间长等缺陷。

发明内容

有鉴于此，本发明目的在于提供一种快速检测焦糖色中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量的方法。本发明提供的方法样品前处理简单，定性定量准确、具有快速、简便、灵敏度高的特点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一种快速检测焦糖色中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量的方法，包括以下步骤：

(1)将焦糖色和水混合后进行超声溶解，得到溶解液；

(2)将所述溶解液与乙腈-异丙醇-吡啶混合液、D6-4-甲基咪唑内标液混合后加入氯甲酸异丁酯进行衍生化处理，得到衍生液；

(3)将所述衍生液、正己烷和碳酸钠溶液混合后进行离心，取上层正己烷相；

(4)将所述正己烷相进行气相色谱-质谱检测，得到谱图，使用内标法计算得到焦糖色中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑的含量。

优选的，所述焦糖色和水的用量比为0.05～0.2g：0.2～0.3mL。

优选的，所述步骤(1)中的混合为涡旋混合；所述涡旋混合的时间为0.5～2min；所述超声溶解的时间为0.5～2min。