[发明专利]圆孢蘑菇中的没食子酸在CDC25磷酸蛋白酶上应用

说明书

本发明公开了一种圆孢蘑菇中活性成分没食子酸的应用，通过该分离提取方法，快速分离圆孢蘑菇各组分，分离提取工艺简单稳定、适合工业化连续生产、产品收率较高、生产成本低，从圆孢蘑菇中获取的活性成分，其中没食子酸具有抑制CDC25磷酸蛋白酶活性作用，因此没食子酸可以应用于抑制CDC25磷酸蛋白酶有关的疾病中。

技术领域：

本发明涉及天然产物的应用技术领域，一种从自然产品中提取活性成分没食子酸的应用，更具体涉及圆孢蘑菇中提取没食子酸及其没食子酸在CDC25磷酸蛋白酶上的应用。

背景技术：

蘑菇科(Agaricaceae)系真菌伞菌目的一科，种类多，分布广泛，大多数可以食用，全世界均有分布。蘑菇科有包括蘑菇属在内的28个属。蘑菇科蘑菇属(Agaricus)中常见种有圆孢蘑菇Agaricus gennadii(Chot.et Boud)P.D.Orton、双孢蘑菇Agaricus bisporus(Large)Sing.、姬松茸Agaricus blazei murrill、紫蘑菇Agaricus rubellus(Gill.)Sacc.、褐蘑菇Agaricus crocopeluspeck等。目前，该属的化学成分以及药理活性研究相关研究主要集中在双孢蘑菇和姬松茸两种。

蘑菇科(Agaricaceae)蘑菇属(Agaricus)的化学成分研究从上个世纪九十年代开始，发现本属真菌的化学成分主要有挥发油、Agariblazeispirol类、甾醇类、固醇类、A-1(吡咯烷酮羧酸钠)、黄酮等。可能含有神经酰胺类成分、胡萝卜苷、二萜类、三萜类、大黄素甲醚，洋芹素-7-4’-二甲醚和愈创木基丙三醇、丁烯羟酸内酯类等。

圆孢蘑菇Agaricus gennadii属伞菌目蘑菇科蘑菇属(Agaricus)，别名“圆孢托柄蘑菇”。圆孢蘑菇呈伞形，有浓郁的蘑菇香味。菌褶幼时乳白色，后渐变为粉红色至黑褐色，单个重58-350g，最大可达2-5kg。夏秋季生长于灌丛沙地、湖边芦苇丛下20-70cm 的土中，在地下能开伞，单生、散生或丛生，多生长在新疆西部及西南部地区。从上世纪九十年代以来，人们已经发现同属中姬松茸的活性成分以及它的多种活性。但同属中的圆孢蘑菇Agaricus gennadii的化学成分以及相关活性尚处在空白中。为开发利用这一资源，在青海省自然科学基金2018-ZL-919的资助下，对圆孢蘑菇的小分子化学成分进行了较系统的研究，对其乙醇提取物抗肿瘤活性做了初步的研究。

没食子酸(英语：Gallic acid)亦称五倍子酸或棓酸，是一种有机酸，可见于五倍子、漆树、茶等植物中。化学式C6H₂(OH)₃COOH。没食子酸易溶于水、醇和醚；具有酚(易被氧化和三氯化铁水溶液生成蓝黑色沉淀)及羧酸(加热时失去二氧化碳成焦性没食子酸)的性质。没食子酸可用作显影剂，它的碱性铋盐用作防腐剂，也用于制药工业上。

研究发现没食子酸具有抗菌,抗病毒,抗肿瘤作用。没食子酸在抗菌抗病毒方面:体外对金黄色葡萄球菌、八叠球菌、α－型键球菌、奈瑟氏球菌、绿脓杆菌、弗氏痢疾杆菌、伤寒杆菌Hd、副伤寒杆菌A等有抑制作用,其抑菌浓度为5mg/ml。体外,在3％的浓度下对17种真菌有抑菌作用,对流感病毒亦有一定抑制作用。在抗肿瘤方面:对吗啉加亚硝钠所致的小鼠肺腺瘤有强抑制作用。

CDC25磷酸蛋白酶是调节正常细胞分裂和细胞应对DNA损伤的重要调控子。研究表明CDC25C磷酸酶亚型对细胞周期进行协同调控。CDC25磷酸酶在许多肿瘤中过度表达，表明特异性的CDC25磷酸酶抑制剂可能成为有前途的癌症治疗药物。

细胞分裂周期的进程是通过CDC25磷酸酶激活一组特殊的细胞周期依赖蛋白酶进行调控的。CDC25蛋白能特异性的脱去CDKs络氨酸/苏氨酸残基上的磷酸基团。