[发明专利]一种在活化的T细胞中具有高活性的启动子

权利要求书

1.一种启动子，从5’端到3’端包含依次连接的CMV增强子、IFNγ启动子和人T细胞白血病病毒的长末端重复序列。

2.如权利要求1所述的启动子，其特征在于，

所述CMV增强子选自：具有SEQ ID NO:8所示核苷酸序列的CMV增强子，或来自人CMV的与SEQ ID NO:8所示核苷酸序列具有至少97％序列同一性的CMV增强子；和/或

所述IFNγ启动子选自：具有SEQ ID NO:4所示核苷酸序列的IFNγ启动子，或来自人的与SEQ ID NO:4所示核苷酸序列具有至少97％序列同一性的IFNγ启动子；和/或

所述人T细胞白血病病毒的长末端重复序列选自：具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的长末端重复序列，或来自人T细胞白血病病毒的与SEQ ID NO:3所示核苷酸序列具有至少97％序列同一性的长末端重复序列。

3.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物含有权利要求1-2中任一项所述的启动子和与该启动子操作性连接的感兴趣的基因。

4.如权利要求3所述的核酸构建物，其特征在于，所述感兴趣的基因编码自分泌抗体，优选为免疫检查点抗体，如PD-1抗体、CTLA4抗体、PD-L1抗体、LAG-3抗体、TIM-3抗体、TIGIT抗体和VISTA抗体，更优选为来源于羊驼的纳米抗体。

5.如权利要求3或4所述的核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物是一表达框。

6.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求1-2中任一项所述的启动子或权利要求3-5中任一项所述的核酸构建物。

7.如权利要求6所述的载体，其特征在于，所述载体为表达载体或克隆载体。

8.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求1-2中任一项所述的启动子、权利要求3-5中任一项所示的核酸构建物或权利要求6-7中任一项所示的载体。

9.如权利要求8所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为免疫细胞，优选为T细胞，其基因组中整合有权利要求3-5中任一项所述的核酸构建物；优选地，所述免疫细胞还表达CAR或含有CAR的表达载体。

10.权利要求1-2中任一项所述的启动子在提高感兴趣的基因在活化的免疫细胞中的表达中的应用，或在制备用于在活化的免疫细胞中增强表达的核酸构建物或载体中的应用。