[发明专利]一种座坚壳菌、应用、发酵培养基及PF1022A的制备方法

说明书

本发明公开一种座坚壳菌、应用、发酵培养基及PF1022A的制备方法；所述座坚壳菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18132；所述座坚壳菌用于PF1022A生产，菌丝生长快，菌丝浓度低，发酵时间短，发酵单位高。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种座坚壳菌、应用、发酵培养基及PF1022A的制备方法。

背景技术

PF1022A是一种对动物低毒、防治谱广、效果好的驱虫药物，其是继大环内酯类驱虫药后，最有潜力的用于牲畜和宠物的一类驱虫药。PF1022A可以与七螺旋状类latrophilin跨膜受体的氨基位点相结合,该受体分离自捻转血矛线虫(Haemonchuscontortus Rudolphi),其作用是诱导外部钙流入细胞。这种新的抗线虫药物的作用模式与已知的驱虫剂,如苯并咪唑类、咪唑并噻唑类、大环内酯类的作用机理大不相同。所以PF1022A类抗虫药物效果好，对耐药的寄生虫同样有强大的杀虫效果。

目前PF1022A合成有固相合成法和生物合成方法。固相合成法步骤繁琐、工艺复杂，不适于大规模生产。而用微生物发酵方式生产PF1022A的报道比较少，产量又比较低，仅限于实验室水平。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种座坚壳菌、应用、发酵培养基及PF1022A的制备方法；所述座坚壳菌用于PF1022A生产，菌丝生长快，菌丝浓度低，发酵时间短，发酵单位高。

为解决以上技术问题，本申请提供的技术方案是一种座坚壳菌，所述座坚壳菌(Rosellinia sp.)保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.18132，保藏日期为2019年6月19日。

本发明提供了所述座坚壳菌在生产PF1022A中的应用。

本发明还提供了用于培养上述座坚壳菌的发酵培养基，以质量百分数计，所述发酵培养基由麦芽糖1.0％～3.5％，糊精0.2％～1.0％，大豆油0.5％～2.0％，麦芽抽提物0.5％～2.0％，黄豆粉0.5％～2.5％，酵母抽提物0.5％～2.0％，磷酸二氢钾0.2％～0.8％，氯化钠0.2％～0.8％，硫酸镁0.1％～0.3％，碳酸钙0.1％～0.5％和余量的水组成

优选的，以质量百分数计，所述发酵培养基由麦芽糖1.0％～3.5％，糊精0.2％～1.0％，大豆油0.5％～2.0％，麦芽抽提物0.5％～2.0％，黄豆粉0.5％～2.5％，酵母抽提物0.5％～2.0％，磷酸二氢钾0.2％～0.8％，氯化钠0.2％～0.8％，硫酸镁0.1％～0.3％，碳酸钙0.1％～0.5％和余量的水组成。

本发明还提供了一种PF1022A的制备方法，包括：上述座坚壳菌经发酵，得到PF1022A。

优选的，所述方法具体包括：将所述座坚壳菌的种子液接种至发酵培养基中培养，得到发酵液。

优选的，所述方法具体包括：

所述座坚壳菌活化接种于斜面培养基中培养；得到斜面菌种；

斜面菌种接种至种子培养基中培养，得到种子液。

优选的，所述方法具体：

所述座坚壳菌活化接种于保藏分离斜面培养基中25～26℃，培养7～10d，得到斜面菌种；

斜面菌种接种至种子培养基中25～26℃,转速230r/min，培养3～5d，得到种子液；

将所述种子液接种至发酵培养基25～26℃,转速230r/min，培养3～5d，得到发酵液。

优选的，将所述种子液接种至发酵培养基25～26℃,转速230r/min，培养135h，得到发酵液。