[发明专利]一种获取木本植物维管形成层的方法及其应用

权利要求书

1.一种获取木本植物维管形成层的方法，其特征在于：

将含有维管形成层的木本植物组织石蜡切片用激光显微切割方法获取其中的维管形成层；

所述的含有维管形成层的木本植物组织是黄梁木种子试管苗移栽后四月龄幼苗的茎节；

所述的石蜡切片，其制作包含将材料固定、脱水、透明、渗蜡、包埋、切片、脱蜡的步骤；

所述的固定所用的固定剂由卡诺固定液与丙酮按体积比(8∶2)～(6∶4)组成；

所述的脱水所用的脱水剂为正丁醇；

所述的透明所用的透明剂为正丁醇；

所述的渗蜡的具体操作为：先采用50％石蜡进行第一次渗蜡，再采用100％石蜡进行第二次～第四次渗蜡；

所述的脱蜡的脱蜡剂为二甲苯，脱蜡的次数为2次；

所述的包埋采用100％石蜡包埋2次

所述的切片，其厚度为12～14μm；

所述的激光显微切割采用Leica AS LMD 7000激光显微切割系统，在10～20倍物镜下，所使用的激光参数体系为：激光能量40～44，激光孔径4～8，切割速度15～16，发射强度100％，脉冲频率1891；

使用石蜡切片结合激光显微切割方法获取的维管形成层组织细胞结构完整，含有完整的RNA；

所述的使用石蜡切片结合激光显微切割方法获取的维管形成层可用于构建cDNA文库。