[发明专利]一种分离纯化大麻黄素的方法

说明书

本发明公开了一种分离纯化大麻黄素的方法，属于植物活性成分提取技术领域。本发明针对现有提取方法中大麻黄素提取率低、纯度低及易失活等问题，将大麻花叶粉碎，然后依次经纤维素酶酶解、低温提取、过滤、浓缩回收、萃取、粗滤、膜过滤、层析、浓缩、结晶、干燥等工艺流程分离纯化获得高纯度的大麻黄素。本发明工艺简单，制备得的大麻黄素不含四氢大麻酚，适合工业化大规模生产。

技术领域

本发明涉及植物活性成分提取技术领域，具体涉及一种分离纯化大麻黄素的方法。

背景技术

工业大麻(Stevia rebaudiana Bertoni)为大麻科大麻属一年生雌雄异株的草本植物，广泛分布于世界各地。世界上大麻属植物主要有野生大麻(CannabisruderalisJanisch)、印度大麻(Cannabis indica Lam)和栽培大麻(Cannabis sativaL)3个种，在长期的生物进化过程中又产生了许多大麻变种和亚种。由于大麻中含有一种致幻成瘾的次生代谢产物—四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol，THC)，因而成为公众熟知的毒品原植物之一。为了方便监管和合理使用，国际上将大麻中THC含量<0 .3％的大麻品种定义不具备毒品利用价值的工业大麻。目前世界上种植工业大麻的国家已达27个，培育出的符合THC含量<0 .3％的工业大麻品种26个。

工业大麻又称汉麻，汉麻全身都是宝主要有纺织、食用和药用三大功能。汉麻皮富含纤维，可用于服装及各种饰品加工; 汉麻杆芯是极佳的木材替代品，还可用来生产超微粉; 汉麻籽富含优质蛋白以及人体必需脂肪酸，可应用于食品、保健品等领域。从大麻的叶、花及花粉中分离得到的已知黄酮类化合物有20多种，它们可以被糖基化、异戊烯基化或甲基化。2002年，McPartland等分离得到了共轭O-糖苷化合物：芹菜素(apigenin)、木犀草素(luteolin)、槲皮素(quercetin)和山奈酚(kaempferol)；同年，Vanhoenacker等分离得到了C-糖苷化合物：荭草苷(orientin)、紫杉醇(vitexin)、木犀草素-7-O-葡萄糖苷(luteolin-7-O-glucoside)和芹菜素-7-O-葡糖苷(apigenin-7-O-glucoside)。此外，大麻中特有的化合物大麻黄素A、大麻黄素B、大麻黄素C。大麻黄素，是大麻中的一类化合物，在化学上属于丙烯基黄酮类，与THC或CBD等大麻素没有关系。大麻黄素A和B属于黄酮类化合物，在1985年被发现，大麻黄素C在2008年被发现。当时已经确认其具有消炎作用，同等质量下比乙酰水杨酸（阿司匹林）的药效强近30倍。大麻黄素A和大麻黄素 B具有抑制类风湿的功效；大麻黄素A和B在体外对前列腺素E有抑制作用，因此很多研究探讨了其在消炎方面的潜力。目前从汉麻叶和汉麻果胶中提取总黄酮工艺已见报道，但实现工业化提取的并不多见。本发明采用甲醇水溶液提取配合柱层析分离纯化，对汉麻叶总黄酮的提取工艺进行优化，以探寻汉麻叶总黄酮的最适提取条件，目的在于研发一个适合工业化大规模生产的工艺，旨在为充分利用汉麻叶中的生物活性成分，实现汉麻资源的综合利用和效益最大化提供指导。

发明内容

针对现有提取方法中大麻黄素提取率低、纯度低，易失活等问题，本发明提供了一种分离纯化大麻黄素的方法，包括如下步骤：

1、将大麻花叶粉碎制成颗粒，加入纤维素酶进行酶解，获得纤维素酶酶解大麻花叶。

2、向步骤1获得的酶解大麻花叶中加入乙醇水溶液，进行低温提取，获得提取液；所述的乙醇水溶液为（20-50%），低温提取温度为45-58℃，时间为30-60min。

3、过滤步骤2获得的提取液，过滤后低温减压浓缩至1/5体积，获得浓缩液；所述的低温减压浓缩温度为45-60℃，真空度为0.05-0.078MPa。

4、向步骤3中获得的浓缩液加入NaOH水溶液，调节PH值至5-6；调至碱性后加入正己烷萃取，合并萃取液，浓缩抽干；所述的NaOH水溶液为2-4%，每次加入正己烷的量为浓缩液的1.6-2.4倍，萃取次数为2-3次。