[发明专利]一种预防、诊断和治疗舌鳞癌的分子标志物及应用

说明书

本发明涉及分子生物学和生物医药技术领域，具体涉及一种预防、诊断和治疗舌鳞癌的分子标志物及应用。本发明公开了一种预防、诊断和治疗舌鳞癌的分子标志物，所述分子标志物为LncRNA DANCR。所述分子标志物在筛选或制备用于诊断舌鳞癌的试剂中的用途以及所述分子标志物在筛选或制备治疗舌鳞癌药物中的用途。本申请发现LncRNA DANCR在舌鳞癌组织中高表达，是诊断舌鳞癌、判断舌鳞癌进展和生存预后的独立指标；且沉默LncRNA DANCR能够抑制舌鳞癌细胞体外的增殖、细胞迁移和侵袭。本申请首次证实LncRNA DANCR是舌鳞癌的一个重要致癌因子，可作为舌鳞癌诊断的分子标志物和治疗的新靶点。

技术领域

本发明涉及分子生物学和生物医药技术领域，具体涉及一种预防、诊断和治疗舌鳞癌的分子标志物及应用。

背景技术

舌鳞状细胞癌(TSCC)是头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的主要类型，复发率高，转移率高，预后差。尽管在预防和治疗方面取得了重大进展，TSCC患者的生存率仍然很低。结果表明，肿瘤的侵袭和迁移是肿瘤发生发展的主要原因。因此，通过对TSCC潜在分子机制的探索，开发新的治疗策略已迫在眉睫。

长链非编码RNA（long noncoding RNA ， lncRNA）是一组长度超过200个核苷酸的长链非编码RNAs。大量报道表明，LncRNAs在细胞增殖、分化、凋亡、迁移和侵袭等多种生物学过程中发挥重要作用。特别是发现LncRNAs与多种肿瘤和TSCC的发展密切相关。例如,lncRNA AFAP1-AS1通过β-catenin Wnt信号通路的激活在TSCC肿瘤组织中高表达促进了肿瘤恶化。NKILA是TSCC转移的关键决定因素，通过抑制上皮-间质转化(EMT)过程来减少细胞迁移和侵袭。有文献报道lncRNA DANCR(分化拮抗非蛋白编码RNA)可抑制表皮细胞的分化，促进肝癌细胞的增殖。DANCR也被认为是多种癌症的致癌lncRNA，如前列腺癌，胃癌和结肠直肠癌等。然而，尚未见解释DANCR在TSCC中发生机制的相关技术。

MicroRNAs (miRNAs)是一类小的非编码RNAs，已被证明可以调节靶基因的表达。近年研究表明，miR-135a-5p是肿瘤侵袭转移的主要调控因子。在非小细胞肺癌(NSCLC)中，miR-135a-5p通过靶向Kruppel-like factor 8 (KLF8)来抑制细胞迁移和侵袭。本领域技术人员公知，KLF8已被广泛证实参与胞周期增殖、转化、EMT和侵袭的调控。通过生物信息学分析，预测DANCR可能与miR-135a-5p有特定的结合位点，因此发明人推测，DANCR可能通过调控miR-135a-5p/KLF8轴而影响TSCC的发生和发展。

为了进一步研究DANCR对TSCC恶性肿瘤的影响，发明人构建了具有DANCR沉默的CAL-27和TCa-8113细胞，以及具有DANCR过表达的SCC9和TSCCA细胞。研究了DANCR对TSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。进一步，论证miR-135a-5p/KLF8轴是DANCR促进TSCC进展的重要通路。现有技术并没有关于DANCR在舌鳞癌组织中表达情况的相关报道，而寻找到有效的早期发病的生物标志物，以及相关的分子机制对指导舌鳞癌临床诊治、治疗及预后有重要意义。总体而言，进一步研究LncRNA DANCR在舌鳞癌发生发展中的作用，对于舌鳞癌的预防、诊断、治疗以及预后都具有非常重要的帮助。

发明内容

鉴于现有技术存在的问题，为寻找舌鳞癌新的诊断分子标志物及治疗靶点，本发明的目的是提供一种预防、诊断和治疗舌鳞癌的分子标志物及应用，本发明公开的一种新的舌鳞癌诊断标志物，能够明确清楚地表征舌鳞癌的发生发展，该标志物在人临床舌鳞癌组织中相比对应正常舌鳞癌组织呈现特异性高表达现象；并且在人舌鳞癌细胞系中也呈现特异性高表达现象。LncRNADANCR作为舌鳞癌的诊断标志物，为舌鳞癌治疗的提供分子靶点，可应用于抗肿瘤的药物的制备。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。