[发明专利]患者来源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型的构建方法及其应用

说明书

本发明属于医药领域，本发明成功将患者来源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型技术引入淋巴瘤药物研发和相关药物体内药敏试验中。构建的患者来源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型，与肿瘤体外药敏试验和传统小鼠移植瘤模型相比，该模型可以更好的研究和进一步阐述肿瘤的发生、发展机制，同时为抗癌药物研发提供了较以往更有价值的新的动物模型。本发明应用于小鼠模型构建领域。

技术领域

本发明涉及一种患者来源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型的构建方法及其应用，用于解决目前淋巴瘤体外药敏实验与临床疗效的符合率低的问题。

背景技术

肿瘤是一种严重威胁人类健康的多发病和常见病，其发病机制尚未完全阐明。淋巴瘤是一种恶性肿瘤，可分为霍奇金淋巴瘤（Hodgkin’s Lymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin’s Lymphoma, NHL）两大类。NHL最多见，约占到85%左右。近年来，NHL的发病率呈逐年上升趋势，发病率位居男性恶性肿瘤的第6位，女性恶性肿瘤的第7位，在0-14岁人群中，发病率高居第3位，严重威胁人类健康。

对于不同类型淋巴瘤患者而言，往往采用的治疗策略和治疗效果是有差异的。换句话说，同一套治疗方案对不同类型淋巴瘤患者可能会有不同效果。例如在DLBCL中，5年生存率均达到70%以上。在高度侵袭性亚型伯基特淋巴瘤（Burkitt）中，患者初始治疗有效率可达48%-83%，而部分患者初始治疗不能获得缓解，或者缓解后复发，而且患者对传统的挽救治疗的缓解率仅为38%，预后仍然较差。对于T/NK细胞性淋巴瘤，由于缺乏有效的靶向药物，与B细胞性淋巴瘤相比，预后更差。

基于上述事实，如何确定淋巴瘤患者肿瘤类型具有重要意义。目前肿瘤体外药敏试验是最简单、易行的一种检测方法，抗肿瘤药物体外作用于肿瘤细胞一定时间后，通过检测活细胞的比例来评判抗肿瘤药物敏感性。但体外药敏实验不足之处在于肿瘤细胞体外培养，忽略了肿瘤微环境对肿瘤生存的影响，也忽略了肿瘤药物体内药代动力学影响，体外药敏实验与临床疗效的符合率只有50%-70%，因此，探索更加敏感、可靠的肿瘤药敏检测方法，对于合理制定肿瘤的个体化治疗方案，提高疗效和预后具有非要重要的实际应用价值。

肿瘤体内药敏试验可以模拟体内微环境，并且考虑了药代动力学对药效影响，弥补了体外药敏试验的不足。

传统的小鼠移植瘤模型是把肿瘤细胞株接种到免疫缺陷小鼠皮下，长成移植瘤，然后给小鼠各种药物处理，用来筛选肿瘤对新药的敏感性以及药物联合对肿瘤的作用。但肿瘤接种至皮下，不能完全模拟体内微环境，造成经过该方法筛选有效的药物，临床试验中无效。因此，它不能指导临床用药，仅限于筛查新药。

肿瘤组织来源小鼠移植瘤模型（Patient-derived xenograft, PDX）技术直接将患者的肿瘤组织接种至免疫缺陷小鼠皮下，长成移植瘤。通过这种方法建立的移植瘤模型，容易形成移植瘤并不断传代，还保持了肿瘤细胞的多样性，另外由于肿瘤组织中有肿瘤自身间质细胞和血管，能够模拟体内微环境等优点。在实体瘤中，Fiebig等的研究显示，基于该模型的抗癌耐药性预测的准确率达97%，敏感性预测准确率达92%。肿瘤组织来源的小鼠移植瘤模型虽然能够用于检测肿瘤药物敏感性，但大部分都是基于实体瘤的研究，在淋巴瘤中还没有报道，具有一定的创新性。因此，本发明建立复发/难治淋巴瘤组织小鼠移植瘤模型，用于靶向新药临床药敏试验的检测，指导临床用药。

本发明可以用于靶向药物敏感性检测，筛选出敏感靶向药物，指导患者个体化用药，最终达到提高疗效，改善预后，解决临床问题。另外，还有利于收集并通过移植瘤传代体外保存淋巴瘤组织，研究淋巴瘤耐药机制，筛选逆转耐药的新的药物。

发明内容