[发明专利]一种动物胆酸类成分的薄层显色剂及薄层鉴别方法

说明书

本发明涉及一种动物胆酸类成分的薄层显色剂及薄层鉴别方法，所述薄层显色剂为含有对甲氧基苯甲醛和硫酸的乙醇溶液；所述薄层鉴别方法，包括以下步骤：(1)将处理后的样品溶液点于同一薄层板上；(2)将挥干样品溶剂后的薄层板，置于预饱和15‑25min展开缸中；(3)挥干展开剂，喷以所述显色剂显色，加热；(4)在365nm紫外灯下检视。本发明的薄层显色剂，与一般的蓝色荧光斑点显色剂对比，专属性更好，更具区分度，特别是在中成药胆酸类成分的薄层鉴别时，不受其他结构相似的胆酸类成分的干扰，亦可避免邻近位置其他成分荧光斑点的颜色遮盖情况。本发明的动物胆酸类成分的薄层鉴别方法，具有操作简单、成本低、适用范围广等优点。

技术领域

本发明涉药品检测分析领域，尤其涉及一种动物胆酸类成分的薄层显色剂及薄层鉴别方法。

背景技术

胆酸类成分是动物胆汁及某些中药(如猪胆粉、牛胆粉、牛黄、体外培育牛黄、人工牛黄等中药材及中成药)中含有的主要成分，主要包括牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸、甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨鹅去氧胆酸、牛磺猪去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、胆酸、去氧胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸等。对于该类成分的薄层鉴别方法，文献(如1.王垒，李圆圆,等.部分含人工牛黄制剂中人工牛黄的质量控制研究[J].时珍国医国药,2017(09):104-106.；2.朱仁愿,蒲玉红.熊胆汁薄层色谱分析方法研究[J].甘肃医药,2015,34(6):459-460.)中多采用10％硫酸乙醇等通用型显色剂，105℃加热后在紫外光灯365nm下检视，各胆酸类成分的荧光斑点颜色基本一致，均为蓝色荧光斑点。

薄层色谱法具有设备简单、操作简便、分离速度快的特点，在中药质量控制中具有直观、显著的优势，是中药中常用的质量控制手段。中国药典收载的胆汁酸类成分的薄层色谱鉴别方法中，通常只对游离型胆酸类成分(胆酸、猪去氧胆酸等)进行鉴别，缺乏对药效作用更优的结合型胆酸类成分的定性分析。(张启明,严克东,等.牛黄中结合胆汁酸的薄层色谱定量[J].中药材,1990(4):14-16)中以异辛烷：异丙醇：正丁醚：冰乙酸：水＝10：9：5：5：1为展开剂，以30％的硫酸乙醇溶液为显色剂，对牛黄中的结合胆酸进行薄层色谱定量，该方法尽管能分离种胆汁酸，但是牛磺胆酸的比移值偏小，不利于其与极性相近成分的分离，游离胆酸的分离度较差，不能很好的实现含胆酸类成分的动物胆汁及某些中药的薄层鉴别。

因此，研发出一种专属性较强的显色剂，且可以应用于动物胆汁及某些中药的胆酸类成分鉴别(游离胆酸和结合胆酸)鉴别方法，成为当今本领域研发人员的研究重点之一。

发明内容

针对现有动物胆酸类成分分析技术中显色方法区分度不高、缺乏结合胆酸的定性分析等问题，本发明提供了一种动物胆酸类成分的薄层显色剂及薄层鉴别方法。

为了实现上述的目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个方面是提供一种动物胆酸类成分的薄层显色剂，所述薄层显色剂为含有对甲氧基苯甲醛和硫酸的乙醇溶液。

进一步地，所述薄层显色剂的制备过程为：取对甲氧基苯甲醛0.2-1ml，加入无水乙醇70-90ml，摇匀，再缓慢加入1-3ml浓硫酸，摇匀，即得。

进一步优选地，所述薄层显色剂的制备过程为：取对甲氧基苯甲醛0.5ml，加入无水乙醇80ml，摇匀，再缓慢加入2ml浓硫酸，摇匀，即得。

本发明的第二个方面是提供一种动物胆酸类成分的薄层鉴别方法，包括以下步骤：

(1)制备得到对照品溶液、对照药材溶液、供试品溶液，将所述的三种溶液点于同一薄层板上；

(2)将展开剂倒入展开缸中，预饱和15-25min，再将挥干样品溶剂后的＝薄层板放入所述展开缸中；

(3)取出薄层板，挥干展开剂，喷以或浸渍所述的薄层显色剂显色，加热；

(4)在365nm紫外灯下检视薄层板上的显色斑点。