[发明专利]携带基因元件组合的嵌合抗原受体细胞文库、制备和筛选方法及用途

权利要求书

1.一种载体组件，其特征在于，包括一种或多种载体，以及插入在所述载体上的三种基因元件，该三种基因元件分别为编码一种或多种独特型嵌合抗原受体的多种第一基因元件；载有一种或多种基因回路的第二基因元件；编码一种或多种可诱导蛋白的第三基因元件，

其中，所述嵌合抗原受体包括细胞内信号传导结构域、跨膜结构域和细胞外识别结构域，所述细胞外识别结构域包括完整的抗体、组成抗体的重链、轻链或抗体片段；所述多种独特型嵌合抗原受体为至少三种独特型嵌合抗原受体。

所述基因回路是预编程性的，包括一种或多种调节性顺势作用因子和/或一种或多种转录因子，在所述第一基因元件编码的嵌合抗原受体活化时，对所述第三基因元件所编码的可诱导蛋白产生表达调控效应；

所述可诱导蛋白包括药物抗性蛋白及自杀蛋白中的一种或两种。

2.根据权利要求1所述的载体组件，其特征在于：

其中，所述抗体片段包括抗体可变区、单链抗体、单域抗体或Fab段；

所述调节性顺势作用因子包括单个顺势作用因子和融合式顺势作用因子，融合式顺势作用因子包括一种或多种单个顺势作用因子的组合；

所述单个顺势作用因子包括NFAT反应启动子元件、NFκB反应启动子元件、四环素反应元件、半乳糖代谢酶系基因启动子的UAS、PIP反应元件、ZFHD1反应元件、ZF21-16反应元件、ZF42-10反应元件、ZF43-8反应元件、ZF54-8反应元件、最小化CMV启动子、CMV启动子、SV40启动子、最小化IL-2启动子、最小化昆虫热休克蛋白70启动子、最小化HIVtata启动子中的任意一种或至少两种的组合；

所述融合式顺势作用因子包括4×NFAT、6×NFAT、5×NFκB、10×NFκB、7×TRE-P_CMV-min、5×UAS-P_CMV-min、4×PIR-P_CMV-min、8×PIR-P_CMV-min、8×PIR-P_hsp70min、4×ZFHD1RE-P_CMV-min、8×ZF21-16RE-P_CMV-min、8×ZF42-10RE-P_CMV-min、8×ZZF43-8R-P_CMV-min、8×ZF54-8RE-P_CMV-min、7×TRE-P_SV40、7×TRE-Pcmv、5×UAS-P_SV40、4×PIR-P_SV40、8×PIR-P_SV40、4×ZFHD1RE-P_SV40、8×ZF21-16RE-P_SV40、8×ZF42-10RE-P_SV40、8×ZF43-8RE-P_SV40、8×ZF54-8RE-P_SV40中的任意一种或至少两种的组合；

所述转录因子包括TetR-VP64(tTA)、Gal4-VP64、PIP-VP64、ZF21-16-VP64、ZF-42-10-VP64、ZF43-8-VP64、ZF54-8-VP64、ZFHD1-VP64、Gal4-KRAB、TetR-KRAB、PIP-KRAB、ZF21-16-KRAB、ZF-42-10-KRAB、ZF43-8-KRAB、ZF54-8-KRAB、ZFHD1-KRAB中的任意一种或至少两种的组合；

所述表达调控效应包括激活转录表达、增强转录表达、终止转录表达、抑制转录表达中的任意一种或至少两种的组合；

所述药物抗性蛋白包括嘌呤霉素抗性蛋白、新霉素抗性蛋白、杀稻瘟素抗性蛋白或潮霉素B抗性蛋白中的任意一种或至少两种的组合；

所述自杀蛋白包括单纯疱疹病毒胸苷激酶蛋白、胞嘧啶脱氨酶蛋白或iCasp9自杀系统蛋白中的任意一种或至少两种的组合。