[发明专利]一种用于小分子抗癌药物递送的纳米复合物

说明书

本发明公开一种基于阳离子共轭聚合物和DNA纳米笼的纳米复合物的制备及其载药应用。它包括阳离子共轭聚合物和DNA纳米笼。所述方法中的聚合物本身具有很强的荧光和稳定性，并且其侧链带有正电，能通过静电吸附作用，与DNA纳米笼中带有负电的磷酸基团结合，形成纳米复合物，该复合物可以利用抗癌药物与DNA双链的相互作用，将其递送到肿瘤细胞内，杀伤肿瘤细胞。本发明公开的纳米复合物具有良好的生物相容性、高稳定性和低生物毒性，可实现多种类型药物的快速递送。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于小分子抗癌药物递送的纳米复合物。

背景技术

癌症又称恶性肿瘤，生长迅速，在体内易扩散，而且治愈起来非常困难。近年来，癌症的发病率逐渐增加，严重威胁到人类的生命健康，及时进行有效的治疗能够增加治愈率。目前存在的传统药物递送系统稳定性较差，存在没有到达靶向部位提前释放药物的问题，会对正常的细胞和组织产生严重的副作用；另一方面部分药物不具有较好的荧光性质，在细胞内不能及时有效的监测。因此需要发展稳定快速可监控的药物递送体系。

由于肿瘤的EPR效应，纳米材料可以实现被动靶向，被广泛用作小分子抗癌药物的载体。目前，纳米载体种类繁多，但大部分材料具有尺度形状不确定性和较强的生物毒性，这大大限制了其在药物精确递送领域的应用。阳离子共轭聚合物具有优良的光稳定性和高的荧光强度，还具有良好的生物相容性和水溶性，广泛应用于生物成像。DNA纳米结构可以程序化设计，具有高度精确的尺度，并且其生物相容性好，无细胞毒性和免疫刺激作用。如DNA四面体具有尺寸可控、结构稳定、易修饰等优点，广泛应用小分子药物的递送，但DNA纳米结构不发光、稳定性差、在血液中容易被降解。

发明内容

本发明所要解决的技术问题为：如何提供一种新型药物递送系统，从而提高DNA纳米结构的稳定性，上载速度，使治疗药物及时准确到达靶向部位，降低对正常细胞和组织的毒副作用。

本发明的技术方案为：

一种用于小分子抗癌药物递送的纳米复合物，它包括阳离子共轭聚合物(cationic conjugated polymer，CCP)和DNA纳米笼(TD)。合成的阳离子共轭聚合物本身具有很强的荧光和稳定性，并且其侧链带有正电，能通过静电吸附作用，与DNA纳米笼中带有负电的磷酸基团结合，治疗肿瘤的光谱抗生素阿霉素可嵌入DNA双螺旋结构中，形成TD-CCP纳米复合物。

进一步地，所述阳离子共轭聚合物与DNA纳米笼的摩尔比为4:1。

进一步地，所述阳离子共轭聚合物为PFBT。

进一步地，所述DNA纳米笼由四条核苷酸自组装构成，四条核苷酸分别为P1-63、P2-63、P3-63和P4-63；其中，P1-63的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，P2-63的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，P3-63的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，P4-63的核苷酸序列如SEQID No.4所示；

进一步地，DNA纳米笼的组装方法为：在50μl体系中分别加入浓度为25μM的P1-63、25μM的P2-63、25μM的P3-63、25μM的P4-63，以10×TM buffer为缓冲液，通过PCR退火自组装形成1μM的DNA纳米笼。

进一步地，所述PCR退火程序为：90℃10min，4℃30min。

进一步地，阳离子共轭聚合物与DNA纳米笼复合的方法为：将阳离子共轭聚合物与DNA纳米笼的按摩尔比为4:1比例混合均匀，在室温下避光静置30-60min，即可得到基于阳离子共轭聚合物与DNA纳米笼的纳米复合物。

阳离子共轭聚合物为聚[(9，9-二辛基芴基-2，7-二基)-交替-共-(1，4-苯并-{2，1’，3}-噻二唑)]。本发明对阳离子共轭聚合物的具体合成步骤没有特殊限定，可以采用本领域熟知的技术路线完成，也可采用以下方式制备：