[发明专利]DLX1和HOXC6在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒

说明书

本发明公开了一种DLX1和HOXC6在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒。该试剂盒操作流程简便，耗时短，质控方法简便、结果重复性好。且使用该试剂盒用于前列腺癌早期诊断、尤其是对于高分级的前列腺癌，和临床病理结果具有非常良好的符合率。

技术领域

本发明涉及一种DLX1和HOXC6在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒，属于生物医药技术领域。

背景技术

前列腺癌(Prostate Cancer，PCa)是一种严重威胁男性健康的恶性肿瘤，占全球肿瘤发病率第二位、死亡率第六位，我国PCa的发病率平均每年增长4.7％，是增加最快的男性恶性肿瘤。上海市疾病控制中心的资料显示，前列腺癌的发病率自2002年起已跃居男性泌尿生殖系恶性肿瘤的首位。

前列腺特异性抗原(Prostate Specific Antigen,PSA)是全世界应用最广泛的前列腺癌早期诊断指标，PSA升高提示患者可能存在前列腺癌，但PSA升高也往往因其他的前列腺疾病引起。以PSA灰区(4-10ng/ml)为例，这些患者穿刺活检的阳性率只有10-25％。据统计全世界每年接受前列腺穿刺活检，其中75％以上是不必要的，穿刺活检会给患者带来许多并发症，如血尿、败血症、感染等，给患者带来极大的痛苦。虽然PSA应用广泛，但也存在上述等较大问题，亟需新的检测靶标来弥补其缺陷。

DLX基因家族是一组转录因子，在胚胎发育阶段启动调控作用。DLX1是DLX基因家族中的重要原癌基因，HOXC6是同源盒基因家族成员，是一种重要的转录因子，在器官形成中起到调控作用。DLX1和HOXC6都与前列腺的恶性进展密切相关。

发明内容

为了克服上述现有技术中的缺点，本发明提供一种多个前列腺相关基因表达联合检测试剂盒及应用，其能够联合检测前列腺相关基因表达，可以明显地提高肿瘤的检出率，其设计巧妙，使用方便，适于大规模推广应用。

为达到以上目的，本发明提供一种DLX1和HOXC6在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒。其能够联合检测前列腺相关基因表达，可以明显地提高肿瘤的检出率，其设计巧妙，使用方便，适于大规模推广应用。

DLX1和HOXC6在制备诊断前列腺癌标志物中的联合应用，所述DLX1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述HOXC6的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

DLX1和HOXC6联合检测前列腺癌的试剂盒，包括DLX1 mRNA、和HOXC6 mRNA的定量检测试剂；所述DLX1 mRNA定量检测试剂包括SEQ IDNO.7和SEQ ID NO.8所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的探针；所述HOXC6 mRNA定量检测试剂包括如SEQ IDNO.10和SEQ ID NO.11所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示的探针。

优选地，上述试剂盒还包括PSA mRNA定量检测试剂，所述PSA mRNA定量检测试剂包括如SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示的探针。

优选地，上述试剂盒还包括一步法RT-PCR反应液，包括One-step RT/RI EnzymeMix，Probe qPCR Supermix。

优选地，上述试剂盒还包括两步法RT-PCR试剂：包括引物探针混合液，RT反应液和PCR反应液；所述RT反应液包括5×Buffer，dNTP，HiScript III Reverse Transcriptase，随机引物，Oligo(DT)和水；所述PCR反应液包括2×Buffer，dNTP，Mg²⁺，AceTaq DNAPolymerase和水。