[发明专利]DLX1，HOXC6和PCA3在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒

权利要求书

1.DLX1，HOXC6和PCA3的定量检测试剂在制备联合诊断前列腺癌试剂盒中的应用，所述DLX1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述HOXC6的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述PCA3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3 所示。

2.根据权利要求1所述的DLX1，HOXC6和PCA3的定量检测试剂在制备联合诊断前列腺癌试剂盒中的应用，其特征在于所述试剂盒包括DLX1 mRNA、HOXC6 mRNA和PCA3 mRNA的定量检测试剂；所述DLX1 mRNA 定量检测试剂包括SEQ IDNO.9 和SEQ ID NO.10 所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.11 所示的TaqMAN 探针；所述HOXC6 mRNA 定量检测试剂包括如SEQ ID NO.12 和SEQ ID NO.13 所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.14 所示的TaqMAN 探针；所述PCA3 mRNA 定量检测试剂包括如SEQID NO.15和SEQ ID NO.16 所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.17 所示的TaqMAN 探针。

3.根据权利要求2所述的DLX1，HOXC6和PCA3的定量检测试剂在制备联合诊断前列腺癌试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括PSA mRNA定量检测试剂，所述PSA mRNA定量检测试剂包括如SEQ ID NO.18 和SEQ ID NO.19所示的检测引物和核苷酸序列如SEQID NO.20 所示的TaqMAN 探针；

DLX1、HOXC6和PCA3 联合应用的判断公式 为p＝1/[1+exp(-z)]，z=1.741*A+0.03*B+0.489*C-4.652,其中A为DLX1得分，B为HOXC6 得分，C为PCA3得分， DLX1得分=DLX1拷贝数/PSA拷贝数；HOXC6得分=HOXC6拷贝数/PSA拷贝数；PCA3得分=PCA3拷贝数/PSA拷贝数。

4. 根据权利要求1所述的DLX1，HOXC6和PCA3的定量检测试剂在制备联合诊断前列腺癌试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂盒还包括一步法RT-PCR反应液，包括SuperScript IV一步法RT-PCR系统，Mg²⁺和水。

5. 根据权利要求1所述的DLX1，HOXC6和PCA3的定量检测试剂在制备联合诊断前列腺癌试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂盒还包括标准品，阴性质控品和阳性质控品；所述标准品包括如SEQ ID NO.5所示的DLX1基因重组质粒、如SEQ ID NO.6所示的HOXC6基因重组质粒、如SEQ ID NO.7所示的PCA3基因重组质粒、如SEQ ID NO.8所示的PSA基因重组质粒；阳性质控品为前列腺癌细胞株LNcap总 RNA逆转录后的cDNA，阴性质控品为正常前列腺上皮细胞株RWPE-1总RNA逆转录后的cDNA。