[发明专利]一种胶质纤维酸性蛋白抗体检测试剂盒及其应用在审
| 申请号: | 201911101693.2 | 申请日: | 2019-11-12 |
| 公开(公告)号: | CN110806485A | 公开(公告)日: | 2020-02-18 |
| 发明(设计)人: | 龙友明;徐辉明;刘天妮 | 申请(专利权)人: | 广州医科大学附属第二医院 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
| 代理公司: | 佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙) 44387 | 代理人: | 曾凤云 |
| 地址: | 510000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 胶质 纤维 酸性 蛋白 抗体 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种胶质纤维酸性蛋白抗体检测试剂盒,其特征在于,其是基于大鼠脑组织进行检测,包括兔源性抗人GFAP抗体、PBS缓冲液、荧光染料CY3、山羊抗兔IgG、FITC、山羊抗人IgG。
2.根据权利要求1所述的试剂盒在胶质纤维酸性蛋白抗体检测中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,包括如下步骤:
S1、制备冰冻大鼠脑组织切片;
S2、分别吸取待测脑脊液和稀释的兔源性抗人GFAP抗体,按比例为1:1滴加到反应板;
S3、将冰冻脑组织切片反盖到反应板上,4℃孵育过夜;
S4、脑切片PBS缓冲液漂洗2次;
S5、分别吸取稀释的水溶性荧光染料CY3标记的山羊抗兔IgG和稀释的FITC标记的山羊抗人IgG,按比例为1:1滴加到反应板;
S6、将冰冻脑组织切片反盖到反应板上,室温孵育2小时;
S7、脑切片PBS缓冲液漂洗2次;
S8、封片;
S9、置荧光显微镜观察。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述步骤S1中,大鼠脑组织切片的制备方法为:
(1)常规麻醉Wistar成年大鼠,断头处死,取脑组织,放入冰冻的4%多聚甲醛浸泡过夜;
(2)冰冻切片机预冷到-20℃,使用OCT包埋剂将待切大鼠脑组织海马及小脑部位包埋;
(3)按30μm厚度切片,将薄片泡入PBS缓冲液溶液;
(4)将切好的薄片在载玻片上小心铺开;
(5)晾干,备用。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述步骤S2中,稀释的兔源性抗人GFAP抗体的稀释倍数为300倍。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述步骤S5中,稀释的CY3标记的山羊抗兔IgG的稀释倍数为100倍。
7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述步骤S5中,稀释的FITC标记的山羊抗人IgG的稀释倍数为100倍。
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