[发明专利]一种检测S100B的光电化学免疫传感器及其制备方法和应用在审
申请号: | 201911088070.6 | 申请日: | 2019-11-08 |
公开(公告)号: | CN110702924A | 公开(公告)日: | 2020-01-17 |
发明(设计)人: | 沈艳飞;周晴;张袁健 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N27/327 |
代理公司: | 32204 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) | 代理人: | 孙斌 |
地址: | 211102 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 光电化学 免疫传感器 特异性结合 免疫生物传感器 制备方法和应用 微型化 共价结合 基底电极 技术要求 双抗夹心 医学诊断 原理构建 传统的 淬灭剂 对电极 种检测 淬灭 基底 修饰 检测 | ||
1.一种检测S100B的光电化学免疫传感器,其特征在于,由Nb9共价结合到C60@PCN-224修饰后的基底电极上,S100B通过免疫反应特异性结合到Nb9上,Nb82@CNQDs特异性结合到S100B上制得。
2.根据权利要求1所述的光电化学免疫传感器,其特征在于,所述基底电极为氧化铟锡半导体电极。
3.根据权利要求1所述的光电化学免疫传感器,其特征在于,所述C60@PCN-224由PCN-224与C60混合超声,搅拌,即得,所述PCN-224与C60的质量比优选为1:(0.1-10)。
4.根据权利要求3所述的光电化学免疫传感器,其特征在于,所述PCN-224由H2TCPP、ZrOCl4、苯甲酸溶解到DMF中,加热反应,洗涤干燥,即得PCN-224。
5.根据权利要求1所述的光电化学免疫传感器,其特征在于,所述Nb82@CNQDs由CNQDs分散液中加入戊二醛搅拌反应,洗涤后重新分散,加入Nb82搅拌孵育,即得Nb82@CNQDs。
6.根据权利要求5所述的光电化学免疫传感器,其特征在于,所述CNQDs由体相CN高温煅烧裂解,用水收集煅烧产生的CN纳米碎片的蒸汽混合物,CNQDs分散在水中,既得CNQDs。
7.一种权利要求1所述的检测S100B的光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)信号层固定:将C60@PCN-224分散溶液滴加在基底电极表面,干燥的室温下晾干,用去离子水清洗,晾干;
(2)锚定识别分子:向步骤(1)得到的基底电极表面滴加EDC/NHS混合溶液,室温放置1-2h,用PBS溶液清洗,清洗后将捕获抗体Nb9滴加到基底电极上,4℃孵育8-12h,然后用PBS溶液清洗;
(3)非特异性位点封闭:向步骤(2)得到的基底电极表面滴加BSA溶液,封闭0.5-1h,然后用PBS溶液清洗;
(4)目标分子S100B的结合:将待测S100B抗原溶液滴到步骤(3)得到的基底电极表面,25-37℃孵育1-2h进行特异性反应,然后用PBS溶液清洗;
(5)光电化学免疫传感器的构建:向步骤(4)得到的电极表面滴加Nb82@CNQDs溶液进行特异性反应,25–37℃孵育1-2h,然后用PBS溶液清洗,晾干,即得光电化学免疫传感器。
8.根据权利要求7所述的光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,步骤(2)中NHS浓度为20-100mM,EDC浓度为50-200mM,Nb9的浓度为5-50μg/mL。
9.根据权利要求7所述的光电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于,步骤(3)中BSA的质量分数为0.5-5%。
10.一种权利要求1所述的检测S100B的光电化学免疫传感器在制备定量检测S100B工具中的应用。
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