[发明专利]一种检测人血清中肿瘤标志物的微流控芯片

权利要求书

1.一种检测人血清中肿瘤标志物的微流控芯片，其特征在于：由生物相容性材质制成，具有至少一检测通道，该检测通道包括依次连通的一连通进样装置的可开闭的进样孔、一孵育腔室和一检测腔室；

上述孵育腔室的底壁上通过三元亲和涂覆法涂覆有由生物相容性材质结合蛋白、亲和素和特异性核酸适配体ssDNA组成的三元亲和结构，上述检测腔室内含有Cas12a核酸内切酶和荧光报告猝灭复合物，该荧光报告猝灭复合物由一荧光报告基团和一相应的荧光猝灭基团通过一DNA序列相连；

上述特异性核酸适配体ssDNA上结合有与其特异互补且能够激活Cas12a核酸内切酶的互补DNA，上述肿瘤标志物在外部驱动力的作用下进入孵育腔室，从孵育腔室中的特异性核酸适配体ssDNA上将上述互补DNA竞争下来，接着通过外界驱动力使该互补DNA经进入检测腔室结合并激活检测腔室内的Cas12a核酸内切酶，激活后的Cas12a核酸内切酶剪切荧光报告猝灭复合物的DNA序列，使荧光报告基团不被荧光猝灭基团抑制，进而通过外界激发光激发而发出荧光。

2.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于：所述生物相容性材质包括PDMS和PMMA。

3.如权利要求1所述的的微流控芯片，其特征在于：其为由外部驱动力驱动的中心对称结构，具有沿周向等间隔分布的若干所述检测通道，

每一所述检测通道均从结构的中心沿径向向外延伸并包括依次连通的一连通进样泵的可开闭的进样孔、一进样通道、一孵育腔室、一连接通道和一检测腔室，检测腔室具有一连通外部的可开闭的排气孔；

所述肿瘤标志物通过离心进入孵育腔室，从孵育腔室中的特异性核酸适配体ssDNA上将所述互补DNA竞争下来，接着通过驱动力使该互补DNA经连接通道进入检测腔室，结合并激活检测腔室内的Cas12a核酸内切酶，激活后的Cas12a核酸内切酶剪切荧光报告猝灭复合物的DNA序列，使荧光报告基团不被荧光猝灭基团抑制，进而通过外界激发光激发而发出荧光。

4.如权利要求3所述的微流控芯片，其特征在于：所述中心对称结构包括从上到下依次完全叠加的一上部盖板、一第一夹片、一第二夹片和一下部基片；其中，所述进样孔位于上部盖板，所述进样通道位于第一夹片，所述孵育腔室由位于第一夹片的上腔室和第二夹片的下腔式共同构成，所述连接通道和所述检测腔室均位于第二夹片，所述排气孔贯穿上部盖板和第一夹片而连通所述检测腔室。

5.如权利要求3所述的微流控芯片，其特征在于：所述外部驱动力的来源包括离心机和驱动泵。

6.如权利要求1至5中任一权利要求所述的微流控芯片，其特征在于：所述孵育腔室和所述检测腔室的顶壁由透明材质制成。