[发明专利]小麦TaARF12基因及其应用在审
申请号: | 201911081824.5 | 申请日: | 2019-11-07 |
公开(公告)号: | CN110846323A | 公开(公告)日: | 2020-02-28 |
发明(设计)人: | 李爱丽;王芳;耿帅锋;毛龙 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/10;C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46;C12Q1/6895 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 陈征 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 taarf12 基因 及其 应用 | ||
1.小麦TaARF12基因的以下任一种应用,其特征在于,
(1)在调控小麦株高中的应用;
(2)在调控小麦穗长中的应用;
所述小麦TaARF12基因位于小麦第二同源群上,其在小麦2A同源染色体的序列如SEQID NO.1所示,其在小麦2B同源染色体的序列如SEQ ID NO.2所示,其在小麦2D同源染色体的序列如SEQ ID NO.3所示。
2.一种小麦TaARF12基因的RNAi片段,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示;所述小麦TaARF12基因位于小麦第二同源群上,其在小麦2A同源染色体的序列如SEQ IDNO.1所示,其在小麦2B同源染色体的序列如SEQ ID NO.2所示,其在小麦2D同源染色体的序列如SEQ ID NO.3所示。
3.小麦TaARF12基因的RNAi载体,其特征在于,含有权利要求2所述的RNAi片段,所述RNAi载体的制备方法包括以下步骤:
(1)利用分别带有BamH I和Kpn I酶切位点的一对引物,扩增TaARF12基因的如SEQ IDNO.12所示RNAi片段,酶切后连接到线性化的pWMB006载体上,得到线性化载体;所述引物核苷酸序列如SEQ ID NO.6-7所示;所述TaARF12基因位于小麦第二同源群上,其在小麦2A同源染色体的序列如SEQ ID NO.1所示,其在小麦2B同源染色体的序列如SEQ ID NO.2所示,其在小麦2D同源染色体的序列如SEQ ID NO.3所示;
所述pWMB006载体的质粒图谱为:
(2)利用分别带有SacI和SpeI酶切位点的一对引物,扩增前述TaARF12基因的RNAi片段的反向互补片段,酶切后连接到所述线性化载体,构建得到中间载体pWMB006-TaARF12,所述引物核苷酸序列如SEQ ID NO.9-10所示;
(3)利用Hind III酶切pWMB006-TaARF12和pWMB111,胶回收带有TaARF12干扰片段的条带,连接到线性化后的pWMB111载体上,获得pWMB111-TaARF12 RNAi载体;
所述pWMB111载体的质粒图谱为:
4.小麦TaARF12 CRISPR/Cas9载体的靶基因片段,其特征在于,所述靶基因片段的序列为SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18;所述小麦TaARF12位于小麦第二同源群上,其在小麦2A同源染色体的序列如SEQ ID NO.1所示,其在小麦2B同源染色体的序列如SEQ ID NO.2所示,其在小麦2D同源染色体的序列如SEQ ID NO.3所示。
5.小麦TaARF12基因的表达抑制剂在降低植物植株高度或促进植株穗子变长中的应用;所述小麦TaARF12基因位于小麦第二同源群上,其在小麦2A同源染色体的序列如SEQ IDNO.1所示,其在小麦2B同源染色体的序列如SEQ ID NO.2所示,其在小麦2D同源染色体的序列如SEQ ID NO.3所示。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述小麦TaARF12基因的表达抑制剂为权利要求2所述的RNAi片段、权利要求3所述的RNAi载体。
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