[发明专利]一种鱼粉微生物发酵及酶解方法

说明书

本发明属于饲料技术领域，公开了一种鱼粉微生物发酵及酶解方法。本发明的鱼粉微生物发酵及酶解方法包括以下步骤：(1)将枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌接种至培养基中，在25‑35℃活化培养36‑60h作为种子液；(2)将鱼粉称取至培养瓶中加水，并调节初始pH为5‑7，灭菌后作为鱼粉培养基放置待用；(3)将活化后的枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌种子液接入鱼粉培养基中，在25‑35℃，搅拌速率100‑300r/min条件下培养；(4)经步骤(3)培养66‑78h后加入木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶或碱性蛋白酶进行酶解。该方法先发酵，再酶解，通过工艺优化和菌种、酶的筛选，获得一种水解率高、利于消化、生物活性高的鱼粉。

技术领域

本发明涉及饲料技术领域，具体是涉及一种鱼粉微生物发酵及酶解方法。

背景技术

我国饲料行业历史悠久，近年来社会需求的不断增加，食品、畜牧行业的快速发展以及人民对优质畜产品的强烈要求，不断刺激着对优质蛋白饲料的需求。蛋白质作为水产饲料中的主要营养物质，是影响饲料成本的关键因素。大多数水产动物，尤其是肉食性鱼类对饲料中的蛋白质含量要求较高(40％-50％)。鱼粉用一种或多种鱼类为原料，经去油、脱水、粉碎加工后的高蛋白质饲料原料，因富含蛋白质、ω-3不饱和脂肪酸，碳水化合物含量低，具有良好的适口性以及较高的消化吸收率等特点，一直以来都是水产饲料中应用最广泛的优质蛋白源，来自渔业和水产养殖业的大量富含蛋白质的副产品被丢弃或加工成的鱼粉。

然而，但现有鱼粉的消化利用率相对较低，而采用微生物发酵工艺可以将鱼粉中的大分子蛋白质水解产生低分子量肽和游离氨基酸，使产物的消化率及生物活性提高，因此开发一种可以改善和提高鱼粉蛋白利用率和转化率的技术对于提高饲料的消化率，促进畜禽生长具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是为了克服上述背景技术的不足，提供一种鱼粉微生物发酵及酶解方法，该方法先发酵，再酶解，通过工艺优化和菌种、酶的筛选，获得一种水解率高、利于消化、生物活性高的鱼粉。

为达到本发明的目的，本发明的鱼粉微生物发酵及酶解方法包括以下步骤：

(1)将枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌接种至培养基中，在25-35℃活化培养36-60h作为种子液；

(2)将鱼粉称取至培养瓶中加水，并调节初始pH为5-7，灭菌后作为鱼粉培养基放置待用；

(3)将活化后的枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌种子液接入鱼粉培养基中，在25-35℃，搅拌速率100-300r/min条件下培养；

(4)经步骤(3)培养66-78h后加入木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶或碱性蛋白酶进行酶解。

进一步地，所述步骤(1)中培养基为LB液体培养基。

进一步地，所述步骤(1)中活化培养时控制搅拌速率为100-300r/min。

进一步地，所述步骤(1)中培养至菌体浓度达到10⁸CFU/mL。

优选地，所述步骤(1)中在30℃条件下活化。

进一步地，所述步骤(2)中鱼粉和水的固液质量比为1：8-1：24。

优选地，当步骤(1)接种的是枯草芽孢杆菌时，所述步骤(2)中鱼粉和水的固液质量比为1：20-1：24；当步骤(1)接种的是地衣芽孢杆菌时，所述步骤(2)中鱼粉和水的固液质量比为1：8-1：20。

优选地，所述步骤(2)中使用NaOH和HCl调节pH。

进一步优选地，所述步骤(2)中调节pH值为6。

进一步地，所述步骤(3)中接入鱼粉培养基中的种子液接种量为5-25％。