[发明专利]一种检测凤丹根皮内丹皮酚含量的方法

说明书

本发明提供了一种检测凤丹根皮内丹皮酚含量的方法，与现有技术相比，本发明通过优化的超声波提取方式直接将丹皮酚从凤丹根皮内完全提取出来，不需要不经过结晶等步骤,直接测定，操作简单，减少损失，检测结果客观准确。而且，本发明通过设计高效液相色谱条件，在该条件下丹皮酚出峰时间较短,高效省时，且峰形较好。

技术领域

本发明属于检测领域，具体涉及一种检测凤丹根皮内丹皮酚含量的方法。

背景技术

丹皮酚是一种从毛茛科植物凤丹的根皮中提取出来的有效药用成分,具有镇痛、抗炎、解热和抑制变态反应的作用,同时也具有镇静、催眠、抗菌、抗炎、抗氧化和降血压的作用,具有极大的研究价值。

对于丹皮酚含量的测定，现有技术是将丹皮酚提取结晶后测定含量，其过程中丹皮酚有较大损失，检测结果不准确。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测凤丹根皮内丹皮酚含量的方法，通过高效液相色谱法(HPLC)测定凤丹根皮丹皮酚含量，直接溶解样品，操作简单，高效省时，而且减少损失，检测结果客观准确。

本发明具体技术方案如下：

一种检测凤丹根皮内丹皮酚含量的方法，包括以下步骤：

1)根部样品前处理:将凤丹根部洗净后，去除木质部；

2)样品粗粉制备:将步骤1)去除木质部的凤丹根皮烘干或者晒干，将凤丹根皮研磨成粉末，过筛，得样品粗粉；

3)待测样品溶液制备：将步骤2)样品粗粉加入甲醇中，制得待测样品溶液；

4)标准品溶液制备：取丹皮酚标准品溶解于甲醇，制成标准品溶液；

5)标准品线性关系的建立：取标准品注入高效液相色谱仪测定，测定峰面积,以丹皮酚进样量为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，建立丹皮酚标准曲线；

6)待测样品丹皮酚含量的测定：将步骤3)制备的待测样品注入高效液相色谱仪测定，获得峰面积，根据步骤5)获得的标准曲线得到丹皮酚含量。

步骤1)中，用灭菌后的剪刀将去除木质部后根皮剪成1cm小段。将凤丹根皮剪成小段，是为了后续晒干或者烘干更加容易，同时也有利于在研磨时更加容易和充分。

步骤1)中具体为：将凤丹根用清水清洗干净后,再用75％酒精浸泡15min消毒，擦净表面酒精后置于通风处4-6小时或者阳光下1-2小时，使其失水变软,剥开，将木质部去除。置于通风处4-6小时或者阳光下1-2小时，使其失水变软,，凤丹根失水变软，有利于木质部与凤丹根更好的分离，去除木质部比较彻底，而且不损失丹凤根皮，进而提高检测的准确度，但在阳光下使其失水变软时，勿在强光下照射过长时间，那样会使得凤丹根皮在去除木质部时外表皮粉碎，遗失，造成测量过程中的不准确。

步骤2)中，所述烘干是指在不高于45℃的烘箱放置30-45min烘干根皮内水分。

步骤2)中，所述晒干是指在通风处，有阳光照射的地方晒干至可以轻易彻底折断，该条件下通风是为了加速凤丹根皮内水份的流失，并且保证环境温度在45℃以下，防止丹皮酚被高温破坏。

步骤2)中烘干或晒干的步骤有利于减少凤丹根皮中的水对检测确定度的影响，同时避免烘干或晒干的温度过高损失丹皮酚，造成损失，影响检测准确度。

进一步的，步骤2)中所述研磨是指在研钵内,用杵子将凤丹根皮彻底研磨粉碎,包括根部较厚的内表皮,使得在后续实验中根皮内的丹皮酚可以被顺利提取出来。过筛是指过100目筛，使得通过筛孔的样品粗粉颗粒较小，可以被甲醇溶液在超声波处理下顺利萃取出丹皮酚。